CARACTERIZAÇÃO FUNCIONAL E ESTUDO DOS MECANISMOS DE RESPOSTAS AO DANO CELULAR CAUSADO PELA L-AMINOÁCIDO OXIDASE DE Calloselasma rhodostoma EM LINHAGENS CELULARES HUMANAS

• Processo: 11/02645-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2014
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia - Análise Toxicológica
• Pesquisador responsável: Suely Vilela
• Beneficiário: Tássia Rafaella Costa
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Citotoxicidade L-aminoácido oxidase
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: atividade inflamatoria | citotoxicidade | L-aminoácido oxidase | Peçonhas de Serpentes | Toxicologia/toxinologia

Resumo

As peçonhas de serpentes de uma forma geral são constituídas por uma grande variedade de proteínas com efeitos tóxicos que podem causar danos teciduais locais ou sistêmicos. A busca por compostos ativos, presentes nas peçonhas de serpentes, que são responsáveis pelo quadro do envenenamento ofídico tem sido alvo de muitas pesquisas. As L-aminoácido oxidases (LAAOs) constituem um dos principais componentes dos venenos de serpentes e tem sido estudadas devido à sua presença em grande quantidade, mas principalmente devido aos diversos efeitos fisiopatológicos em que está envolvida como, indução de apoptose, citotoxicidade, indução e/ou inibição de agregação plaquetária, hemorragia, hemólise, edema, atividade bactericida, leishmanicida, anti-HIV, entre outros. As LAAOs isoladas e caracterizadas de venenos de serpentes tornaram-se importantes alvos de pesquisa, devido ás suas possíveis aplicações biotecnológicas, na busca de novos fármacos de interesse na clínica médica e científica. O principal objetivo deste projeto é caracterizar funcionalmente a L-aminoácido oxidase de Calloselasma rhodostoma (CR-LAAO) a fim de avaliar a ação dessa proteína no processo inflamatório, na atividade antiparasitária (tripanomicida e leishmanicida), fungicida, bactericida e citotóxica sobre as células tumorais HL-60 e HEPG2 e células normais PBMC. Outros parâmetros para análise de indução de células apoptóticas serão avaliados pela metodologia de citometria de fluxo, além da análise da atuação dessa toxina sobre o ciclo celular. Em sequência, serão verificadas as vias de atuação da CR-LAAO frente aos estudos de expressão gênica, caracterizando as vias de apoptose mediadas pelos genes pró-apoptóticos Bax, Fas e o gene anti-apoptótico Bcl-2, utilizando a metodologia de PCR em tempo real. Este estudo permitirá a melhor compreensão dos diversos mecanismos de ação que envolvem esta enzima multifuncional e abrirá perspectivas para uma possível utilização desta proteína como modelo molecular e para o desenvolvimento de novos fármacos para aplicações terapêuticas.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

COSTA, TASSIA R.; MENALDO, DANILO L.; DA SILVA, CASSIO PRINHOLATO; SORRECHIA, RODRIGO; DE ALBUQUERQUE, SERGIO; PIETRO, ROSEMEIRE C. L. R.; GHISLA, SANDRO; ANTUNES, LUSANIA M. GREGGI; SAMPAIO, SUELY V.. Evaluating the microbicidal, antiparasitic and antitumor effects of CR-LAAO from Calloselasma rhodostoma venom. International Journal of Biological Macromolecules, v. 80, p. 489-497, SEP 2015. (11/23236-4, 11/02645-3)

COSTA, TASSIA R.; BURIN, SANDRA M.; MENALDO, DANILO L.; DE CASTRO, FABIOLA A.; SAMPAIO, SUELY V.. Snake venom L-amino acid oxidases: an overview on their antitumor effects. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 20, JUN 2 2014. (11/02645-3, 12/11963-1, 11/23236-4)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

COSTA, Tássia Rafaella. Caracterização funcional e estudo dos mecanismos de resposta ao dano celular causado por uma L-aminoácido oxidase de Calloselasma rhodostoma em linhagens celulares humanas. 2014. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (PCARP/BC) Ribeirão Preto.