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Purificação de lipases microbianas nativas por técnicas cromatográficas

Processo: 06/03750-7
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Vigência (Início): 01 de setembro de 2006
Vigência (Término): 31 de agosto de 2007
Área do conhecimento:Ciências Exatas e da Terra - Química
Pesquisador responsável:Patrícia de Oliveira Carvalho
Beneficiário:Fabiano Jares Contesini
Instituição-sede: Pró-Reitoria Acadêmica. Universidade São Francisco (USF). Campus Bragança Paulista. Bragança Paulista , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:06/01393-2 - Purificação e imobilização de lipases microbianas nativas para a esterificação enantioseletiva do ibuprofeno racêmico, AP.R
Assunto(s):Biocatálise   Purificação   Lipase

Resumo

Durante o projeto o aluno receberá treinamento para a realização do processo de purificação de enzimas usando o sistema FPLC (fast protein liquid chromatography), uma técnica de cromatografia líquida usada para rápida purificação de proteínas a partir de uma mistura complexa. Ao sistema serão acopladas colunas abertas, sendo o fluxo da amostra mantido contínuo através de bombas e o produto purificado analisado por monitor UV. A purificação será realizada por diferentes técnicas cromatográficas como troca iônica e permeação em gel. Aliado a isso, o aluno participará dos experimentos que envolvem a produção das lipases de Aspergillus niger e Aspergillus terreus utilizando fermentação submersa em shaker de bancada para obtenção dos extratos enzimáticos brutos, caracterização bioquímica e de estabilidade das lipases purificadas, e por último, verificação do potencial na resolução antes e após o processo de purificação.