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Genótipos da haptoglobina nas doenças falciformes

Processo: 08/07114-3
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Vigência (Início): 01 de setembro de 2008
Vigência (Término): 30 de junho de 2009
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
Pesquisador responsável:Maria de Fatima Sonati
Beneficiário:Braian Henrique Pavan
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Médicas (FCM). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:08/01690-2 - Genótipos da haptoglobina nas doenças falciformes, AP.R
Assunto(s):Polimorfismo genético

Resumo

Para dar suporte ao projeto de pesquisa e capacitar-se em técnicas hematólógicas, de análises protéicas e moleculares, o estagiário deverá cumprir um programa que envolverá as seguintes atividades: - preparo de soluções e tampões- determinação dos parâmetros hematológicos (no. de hemácias, de leucócitos e de plaquetas, hematócrito e hemoglobina, contagem leucocitária diferencial, índices hematimétricos e plaquetários) em contadores eletrônicos- confecção, manual e automatizada, e observação morfológica, por microscopia direta, de esfregaços sangüíneos- preparo e contagem, manual e automatizada, de reticulócitos- preparo de hemolisados livres de estroma- eletroforese de hemoglobinas em pH alcalino (acetato de celulose)- eletroforese de hemoglobinas em pH ácido (gel de ágar)- quantificação da Hb A2 por eluição da banda correspondente após eletroforese em acetato de celulose- quantificação da Hb Fetal por desnaturação alcalina- análise qualitativa e quantitativa de hemoglobinas por cromatografia líquida de alta performance (HPLC) de troca catiônica- análise de cadeias globínicas por HPLC em fase reversa (RP-HPLC)- teste de solubilidade das hemoglobinas- determinação dos níveis plasmáticos de haptoglobina por nefelometria- Extração de DNA dos leucócitos do sangue periférico- Amplificação seletiva de genes de interesse por PCR- PCR alelo-específica para genotipagem da haptoglobina- Análises de Restrição