Inversão sexual e conservação de Serranídeos: viabilidade na utilização de inibidores de aromatase e monitoramento histofisiológico durante a inversão do sexo da garoupa (Epinephelus marginatus), hermafrodita protogínica.

• Processo: 09/07217-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia Comparada
• Pesquisador responsável: Renata Guimarães Moreira Whitton
• Beneficiário: Larissa Suzuki Amaral
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 07/59122-7 - Inversão sexual e conservação de serranideos: viabilidade na utilização de inibidores de aromatase e monitoramento histofisiologico durante a inversão do sexo da garoupa (Epinephelus marginatus), hermafrodita protogínica, AP.R
• Assunto(s): Endocrinologia Conservação Peixes
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Conservação | Endocrinologia | histomorfologia | inversão sexual | Peixes | Piscicultura Marinha | Endocrinologia

Resumo

A presente bolsa está sendo solicitada para o apoio técnico no Laboratório de Metabolismo de Organismos Aquáticos (IB/USP) para a condução das atividades de análise do projeto acima citado. O presente trabalho envolve diversas etapas de análise de amostras em laboratório, destacando aqui análises como histologia e imunohistoquímica das gônadas e hipófise, detecção de células apoptóticas, determinação de viabilidade do sêmen e ainda determinação de esteróides gonadais. Além disso, o envolvimento com as atividades de campo é intenso, haja vista que os animais permanecerão em condições experimentais na Base do Instituto de Pesca em Ubatuba. O desenvolvimento do trabalho em 2 locais distintos, exige um apoio técnico, que será imprescindível para a condução do trabalho dentro do cronograma proposto e disponibilizar os resultados dentro de um prazo adequado para que se possa iniciar a aplicação em grande escala da inversão sexual, que contribuirá, como citado no projeto para o repovoamento da espécie em estudo.Desta forma, as atividades propostas para o técnico envolvido no presente trabalho serão:1. Manutenção da rotina básica do laboratório, como limpeza de vidraria e controle do estoque de insumos necessários à condução do projeto;2. Levantamento de custos e aquisição de insumos e equipamentos;3. Auxílio ao pesquisador no controle financeiro do projeto4. Apoio na determinação dos esteróides gonadais - utilização de kits de Elisaimunoensaio para a quantificação de estradiol, testosterona, 11 ceto-testosterona (11-kt) e 17a-hidroxiprogesterona;5. Apoio nas análises histológicas e imunohistoquímicas das gônadas e hipófise - A técnica de histologia demanda de muito tempo, pois envolve o preparo das amostras (desidratação e diafanização) para a inclusão em parafina ou paraplast. Esta fase demanda de cerca de 8-10 horas seguidas, devido ao grande número de banhos envolvidos. Na sequência estes blocos de parafina contendo as amostras serão cortados em micrótomo e, no caso das hipófises, a correta interpretação das células secretoras, muitas vezes envolve a necessidade de se realizar cortes seriados, o que demanda bastante tempo também. Etapas como coloração são mais rápidas. As técnicas a serem utilizadas nestas análises estão detalhadamente descritas no projeto em anexo.6. Apoio na detecção de células apoptóticas (método de TUNEL) - Esta técnica certamente será importante para responder a uma questão crucial deste projeto, que é a ocorrência do processo de apoptose do tecido germinativo masculino. É a primeira vez que esta técnica será empregada em nosso laboratório, portanto requeremos um envolvimento grande de tempo para definição dos protocolos.Este pedido está sendo solicitado, pois, o Departamento de Fisiologia do IBUSP não dispõe de recursos humanos de apoio técnico suficiente para disponibilizar a todos os docentes.