| Processo: | 11/00385-4 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Iniciação Científica |
| Data de Início da vigência: | 01 de maio de 2011 |
| Data de Término da vigência: | 31 de dezembro de 2011 |
| Área de conhecimento: | Ciências da Saúde - Medicina |
| Pesquisador responsável: | Ricardo Pimenta Bertolla |
| Beneficiário: | Paula Intasqui Lopes |
| Instituição Sede: | Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Biomarcadores Reprodução humana Espermatozoides Fragmentação do DNA Proteômica |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | biomarcadores | Espermatozóide | Fragmentação de DNA | proteômica | Reprodução Humana |
Resumo Sugere-se que a fragmentação do DNA do espermatozóide é um importante marcador para diagnóstico e prognóstico de infertilidade, uma vez que reduz as taxas de gravidez natural e após a realização de técnicas de reprodução assistida. No entanto, os métodos atuais para avaliação da fragmentação do DNA são caros e trabalhosos, além de não distinguir os danos clinicamente relevantes. Portanto, faz-se necessária a busca por biomarcadores protéicos, que, futuramente, poderão ser usados na avaliação da qualidade do espermatozóide. Em vista disso, o presente projeto propõe o estudo proteômico de plasma seminal e de espermatozóides em pacientes com baixa e com alta fragmentação de DNA de espermatozóides, para posterior comparação e busca por marcadores de fragmentação de DNA. Para isso, primeiramente será feito o processamento seminal e a separação do plasma seminal dos espermatozóides. Em seguida, será avaliada a taxa de fragmentação de DNA em cada amostra por meio do ensaio Cometa alcalino. Com isso, serão selecionados os 20 pacientes com menor taxa de fragmentação de DNA e os 20 pacientes com maior taxa. Para a proteômica, será realizada a eletroforese bidimensional e a identificação das proteínas correspondentes aos spots de interesse por meio de espectrometria de massas (MALDI-ToF MS/MS). Com esses resultados, espera-se obter possíveis marcadores protéicos para a fragmentação de DNA de espermatozóides, tanto no próprio espermatozóide quanto no plasma seminal. Esses marcadores poderão ser utilizados no diagnóstico e no tratamento de infertilidade masculina e na seleção dos espermatozóides sem danos ao DNA para injeção no oócito. | |
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