Fingerprinting por MALDI-TOF e ESI-MS para identificação de bactérias em meios de cultura de embriões e sêmen visando a excelência sanitária da produção in vitro de embriões bovinos

• Processo: 11/06191-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Marcos Nogueira Eberlin
• Beneficiário: Alessandra Tata
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 13/15575-9 - Procura e mapeamento de quorum sensing em fungos por espectrometria de massas em condições ambientes: determinação do perfil químico e localização de moléculas envolvidas em biocontrole entre agentes fúngicos e diferentes patógenos, BE.EP.PD
• Assunto(s): Bovinos Controle sanitário Fertilização in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: bacteria | bovino | controle sanitario | Espectrometria de massas | fertilização in vitro | Maldi-Tof | Biotecnologia da Reprodução

Resumo

A qualidade da carne brasileira, a qual é reconhecida mundialmente, é o resultado da seleção genética na raça Nelore, naturalmente mais resistente à alta temperatura do clima tropical, à doenças e diversos parasitas, comparando-se às raças taurinas. Entretanto, o Brasil não é líder em ciência e desenvolvimento de novas técnicas em biotecnologias da reprodução bovina. Recentemente, um dos revisores de nossos artigos científicos comentou que nosso País "não pode ser considerado líder em produção in vitro de embriões somente pelo fato de produzi-los em maior quantidade". Dessa forma, precisamos reconhecer que os investimentos em pesquisas e inovação são de grande necessidade as biotecnologias como a fertilização in vitro (FIV) e transferência nuclear (TN). A certificação sanitária de embriões representa um grande desafio para o comércio de embriões de disseminação da alta qualidade de genética mundial por meio de embriões produzidos por FIV e TN. Dessa forma, empresas dedicadas à biotecnologia de embriões bovinos devem incorporar procedimentos sanitários em sua rotina visando a exportação de embriões. Também há necessidade de um diagnóstico sanitário da produção in vitro (PIV) de embriões bovinos, ou seja, um estudo epidemiológico visando rastrear e evitar a contaminação do meio de cultura com bactérias presentes no ambiente das fazendas e por sêmen congelado. Uma vez que a produção in vitro (PIV) de embriões bovinos representa uma percentagem considerável do número total de embriões bovinos produzidos no Brasil e há necessidade de metodologias de identificação de presença de microrganismos contaminantes do processo de PIV, o objetivo deste projeto interdisciplinar e colaborativo é propor a utilização de métodos reconhecidamente práticos e eficazes por espectrometria de massas (MS) para a identificação rápida de bactérias e estudo epidemiológico por meio do perfil de proteínas conservadas ou por seus metabólitos presentes em meios de cultura e amostras de sêmen, visando o rastreamento de fontes contaminantes e introduzindo uma nova ferramenta de controle de contaminação bacteriana em PIV. O delineamento experimental inclui a identificação de microrganismos contaminantes de meios de cultura e amostras de sêmen provenientes da Empresa In Vitro Brasil Ltda, localizada na cidade de Mogi Mirim-SP. Serão utilizadas duas técinas de MS: ionização por dessorção a laser assistida por matriz (MALDI-TOF), combinada com um software contendo uma base de dados bacteriana (Biotyper, Bruker Daltonics, EUA), e a caracterização química de metabólitos por MS com fonte de ionização por electrospray (ESI-MS) de bactérias em busca de biomarcadores capazes de indicar de crescimento bacteriano em fase inicial. Para um número representativo de amostras, será realizada a identificação microbiológica clássica para comparação com os resultados de MALDI-TOF e ESI-MS. A proximidade da Empresa In Vitro Brasil Ltda e UNICAMP (55Km), bem como a interdisciplinaridade e aplicabilidade deste projeto deverão resultar na introdução de estratégias inovadoras e relevantes para o controle sanitário do PIV em bovinos, assim como publicações de impacto científico na área de biotecnologia de embriões. (AU)

Publicações científicas

(12)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

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