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Análise fosfoproteômica da via de transdução de sinal induzida por TNF-alfa humano em Schistosoma mansoni

Processo: 10/14683-4
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de agosto de 2011
Vigência (Término): 31 de julho de 2012
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Sergio Verjovski Almeida
Beneficiário:Mariana Lombardi Peres de Carvalho
Instituição-sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Esquistossomose   Schistosoma mansoni   Fator de necrose tumoral alfa   Espectrometria de massas   Western blotting   Eletroforese em gel bidimensional

Resumo

A esquistossomose é uma doença parasitária que acomete atualmente mais de 200 milhões de pessoas. A espécie Schistosoma mansoni é a causadora da parasitose nas Américas. Nosso grupo caracterizou recentemente um gene homólogo ao receptor de TNF-± humano (um receptor do tipo TNF-± non-death domain) que é mais expresso no estágio de cercária, a forma infectante do hospedeiro vertebrado. Além disso, verificou-se que esquistossômulos após 3hs de transformação das cercárias, e vermes adultos pareados, quando expostos em cultura ao TNF-± humano, apresentam mudança estatisticamente significativa na expressão de centenas de genes em ambos os estágios. Neste mesmo trabalho foi realizada uma análise in silico dos membros da via canônica de transdução de sinal de TNF de vertebrados, que são regulados via fosforilação de proteínas; foram identificados no conjunto de dados de sequencia de ESTs e mRNAs de S. mansoni todos os genes que codificam as proteínas minimamente necessárias para que ocorra a transdução de sinal no parasita, ativada pelo receptor tipo non-death domain. Assim, se sugeriu a possível via de transdução de sinal de S. mansoni para a citocina humana TNF-±. Este projeto tem com objetivo a caracterização da via de transdução de sinal induzida pelo TNF-± em vermes adultos e esquistossômulos através de análise de fosforilação de proteínas por eletroforese em gel bidimensional corado com corante específico para fosfoproteínas, por espectrometria de massas e validação dos experimentos por Western Blot. (AU)