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Efeito do tempo de tratamento e da dose de fluoreto administrada cronicamente na expressão protéica em fígado de ratos

Processo: 11/17263-9
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de dezembro de 2011
Vigência (Término): 30 de novembro de 2015
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Odontologia Social e Preventiva
Pesquisador responsável:Marília Afonso Rabelo Buzalaf
Beneficiário:Heloisa Aparecida Barbosa da Silva Pereira
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
Assunto(s):Fígado   Fluoretos   Bioquímica   Proteômica

Resumo

Em trabalho prévio realizado pelo nosso grupo foi observado que o fluoreto pode provocar alterações na expressão de várias proteínas hepáticas. Em adição, há relatos na literatura sugerindo que as alterações causadas pelo fluoreto no organismo são dose e tempo-dependentes. Assim, o objetivo deste trabalho é analisar alterações em fígado de ratos submetidos à intoxicação crônica por fluoreto em diferentes tempos e doses, utilizando análises proteômicas e histológicas como ferramentas. Serão utilizados para isso 36 ratos Wistar machos com 21 dias, que serão divididos em 2 grupos (n=18 animais por grupo), de acordo com o tempo de tratamento (20 dias, grupo A, ou 60 dias, grupo B). Cada grupo será dividido em 3 subgrupos (n=6 animais por subgrupo), de acordo com a dose de fluoreto a ser administrada através da água de beber, a saber: 0 mg/L (controle- subgrupos A1 e B1), 15 mg/L (subgrupos A2 e B2) ou 50 mg/L (subgrupos A3 e B3). Todos os grupos receberão, durante o tratamento, ração AIN-93, contendo baixo teor de fluoreto. Decorridos os períodos experimentais, os animais serão anestesiados em 0,5 mL/Kg de peso de Anasedan + 1,5 mL/Kg de cloridadto de quetamina vetaset, e o fígado e o sangue serão coletados. Será feita análise de fluoreto no plasma e tecido hepático com o eletrodo íon específico, após difusão facilitada por hexametildisiloxano. Também será feita a fixação de parte do fígado para a confecção das lâminas para análise histológica. Após a extração das proteínas hepáticas, as mesmas serão submetidas à eletroforese bidimensional. Os géis dos grupos controle e tratados serão escaneados utilizando-se o ImageScanner e analisados com o software ImageMaster Platinum. Os spots de interesse serão então excisados e analisados por espectrometria de massa para identificação das proteínas diferencialmente expressas. Após verificação da normalidade e homocedasticidade dos dados, os mesmos serão submetidos à análise estatística apropriada (p<0,05). (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
BARBOSA DA SILVA PEREIRA, HELOISA APARECIDA; DIONIZIO, ALINE SALGADO; ARAUJO, TAMARA TEODORO; FERNANDES, MILENI DA SILVA; IANO, FLAVIA GODOY; RABELO BUZALAF, MARILIA AFONSO. Proposed mechanism for understanding the dose-and time-dependency of the effects of fluoride in the liver. Toxicology and Applied Pharmacology, v. 358, p. 68-75, NOV 1 2018. Citações Web of Science: 3.
BARBOSA SILVA PEREIRA, HELOISA APARECIDA; DIONIZIO, ALINE SALGADO; FERNANDES, MILENI SILVA; ARAUJO, TAMARA TEODORO; CESTARI, TANIA MARY; BUZALAF, CAMILA PERES; IANO, FLAVIA GODOY; RABELO BUZALAF, MARLIA AFONSO. Fluoride Intensifies Hypercaloric Diet-Induced ER Oxidative Stress and Alters Lipid Metabolism. PLoS One, v. 11, n. 6 JUN 23 2016. Citações Web of Science: 7.

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