Expressão gênica de amphiregulin pela ativação da via phosphatidylinositol-3-kinase em células tumorais de mama tratadas com triiodotironina

• Processo: 11/22312-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de fevereiro de 2012
• Vigência (Término): 31 de janeiro de 2013
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Sandro José Conde
• Beneficiário: Vinicius Rodolfo Bassoli
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Tri-iodotironina Peptídeos e proteínas de sinalização intracelular Hormônios tireóideos Fosfatidilinositol 3-quinases Sinalização intracelular Neoplasias mamárias Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Câncer de mama | expressão gênica | Pi3K | sinalização intracelular | triiodotironina | Hormônio Tireoidiano

Resumo

Sabe-se que o estrógeno (E2) e o status hormonal da paciente são importantes para a proliferação e o tratamento do câncer de mama (CaM). Quanto ao hormônio tireoidiano (T3), apesar dos estudos epidemiológicos serem ainda contraditórios em relação a sua influência no câncer de mama, estudos laboratoriais demonstram sua capacidade de aumentar a proliferação de células de CaM com receptor de E2 (ER) positivo, induzindo a expressão de genes normalmente estimulados por E2 (PR, TGFa). Embora o T3 exerça muitas ações pela regulação genômica clássica da transcrição gênica, um número de efeitos do T3 ocorre rapidamente e não são afetados por inibidores da síntese protéica. Ações não genômicas dos hormônios tireoidianos são descritas na membrana plasmática, no citoplasma e em organelas celulares. In vitro, independente da síntese protéica, a tiroxina (T4) induz inositol trifosfato (IP3) e sinalização pelo cálcio aumentando os efeitos de interferon-g via PKC e PKA. Recentemente o nosso grupo demonstrou que o gene da Amphiregulin (AREG) foi estimulado por E2 e T3 nas células MCF-7. Dessa forma, nossa hipótese é que o hormônio tireoidiano altera a expressão do gene AREG sem a necessidade de ligação com receptores nucleares, ou seja, através da via de ativação de PI3K. Para tanto, pretende-se elucidar melhor a via de ação dos hormônios tireoidianos na ativação gênica da amphiregulin em linhagens celulares de adenocarcinoma de mama. Metodologia: A linhagem celular de câncer de mama MCF-7 será plaqueada em intervalos de tempo de 10 minutos, 30 minutos, 1 hora e 4 horas com T3 (10-8M), T3 (10-8M) + LY294002 (50µM), LY294002 (50µM) na ausência ou presença de ciclohexamida. Será realizado extração de RNA total para a obtenção do cDNA - Transcrição reversa (RT) do RNA e PCR tempo real para expressão de AREG em cada tratamento.