| Processo: |
11/12317-3
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| Linha de fomento: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Vigência (Início): |
01 de março de 2012
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| Vigência (Término): |
30 de novembro de 2015
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| Área do conhecimento: | Ciências da Saúde
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Farmácia
-
Análise Toxicológica |
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| Pesquisador responsável: | Eliane Candiani Arantes Braga |
| Beneficiário: | Fernanda Gobbi Amorim |
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| Instituição-sede: |
Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
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| Bolsa(s) vinculada(s): | 13/26083-0 - Análise de modificações pós-traducionais de toxinas nativas e recombinantes da peçonha Tityus serrulatus por espectrometria de massas,
BE.EP.DR
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| Assunto(s): | Transcriptoma
Toxicologia
Hialuronidase
Tityus |
Resumo
Atualmente, o interesse pelo estudo das características químicas e funcionais de toxinas isoladas de peçonhas animais não é devido somente à sua relevância no envenenamento, mas também à sua potencial utilização como fármacos para o tratamento de uma diversidade de doenças. Com o advento das técnicas "ômicas", como o transcriptoma, foi possível não só a caracterização dessas toxinas, mas também a identificação de novos componentes com potencial biotecnológico. Entretanto, apesar da diversidade de ações fisiológicas e do potencial farmacológico apresentado pelas toxinas animais, há uma discrepância entre o enorme número de proteínas isoladas e caracterizadas e a quantidade de proteínas que vêm a se tornar efetivamente um medicamento, o que se deve às limitações na obtenção de toxinas em quantidades suficientes para uma caracterização estrutural e funcional detalhada das mesmas. Desta forma, a expressão heteróloga de proteínas consiste em uma alternativa para a obtenção de moléculas, tanto em escala laboratorial para o estudo de suas atividades enzimáticas e funcionais, quando em escala industrial, visando à produção de fármacos em larga escala. Diante desse panorama, o presente projeto apresenta dois objetivos principais, sendo eles: a construção da biblioteca de cDNA da glândula de peçonha de Tityus serrulatus para a identificação de toxinas com potencial biotecnológico; e a clonagem e expressão em sistema heterólogo da hialuronidase e/ou novas toxinas obtidas a partir do transcriptoma, além da sua caracterização estrutural e funcional visando a validação do processo de expressão heteróloga. Para tanto, serão aplicadas técnicas de biologia molecular para produção do transcriptoma a partir da glândula de peçonha e as sequências de interesse serão clonadas em vetor de expressão para a realização da expressão em sistema heterólogo. Para validação do processo de expressão, as formas nativas obtidas a partir da peçonha, como a hialuronidase, serão purificadas por meios cromatográficos e submetidas a caracterização estrutural com espectrometria de massas, sequenciamento amino-terminal, eletroforese, entre outros. Além disso, as formas nativas e recombinantes serão caracterizadas quanto aos parâmetros bioquímicos (cinética enzimática, determinação de ponto isoelétrico e atividade sobre diferentes substratos) e funcionais (ensaios in vivo). Portanto, esse projeto será capaz de validar o processo de expressão heteróloga no qual poderá fornecer toxinas de difícil purificação da peçonha e/ou novas toxinas com alto potencial biotecnológico. (AU)
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Publicações científicas
(9)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
AMORIM, FERNANDA GOBBI;
BOLDRINI-FRANCA, JOHARA;
FIGUEIREDO BORDON, KARLA DE CASTRO;
CARDOSO, IARA AIME;
DE PAUW, EDWIN;
QUINTON, LOUC;
KASHIMA, SIMONE;
ARANTES, ELIANE CANDIANI.
Heterologous expression of rTsHyal-1: the first recombinant hyaluronidase of scorpion venom produced in Pichia pastoris system.
Applied Microbiology and Biotechnology,
v. 102,
n. 7,
p. 3145-3158,
APR 2018.
Citações Web of Science: 5.
BOLDRINI-FRANCA, JOHARA;
COLOGNA, CAMILA TAKENO;
PUCCA, MANUELA BERTO;
FIGUEIREDO BORDON, KARLA DE CASTRO;
AMORIM, FERNANDO GOBBI;
PINO ANJOLETTE, FERNANDO ANTONIO;
CORDEIRO, FRANCIELLE ALMEIDA;
WIEZEL, GISELE ADRIANO;
CERNI, FELIPE AUGUSTO;
PINHEIRO-JUNIOR, ERNESTO LOPES;
TANAKA SHIBAO, PRISCILA YUMI;
FERREIRA, ISABELA GOBBO;
DE OLIVEIRA, ISADORA SOUSA;
CARDOSO, LARA AIME;
ARANTES, ELIANE CANDIANI.
Minor snake venom proteins: Structure, function and potential applications.
BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-GENERAL SUBJECTS,
v. 1861,
n. 4,
p. 824-838,
APR 2017.
Citações Web of Science: 18.
PUCCA, MANUELA BERTO;
CERNI, FELIPE AUGUSTO;
PINHEIRO-JUNIOR, ERNESTO LOPES;
ZOCCAL, KARINA FURLANI;
FIGUEIREDO BORDON, KARLA DE CASTRO;
AMORIM, FERNANDA GOBBI;
PEIGNEUR, STEVE;
VRIENS, KIM;
THEVISSEN, KARIN;
ANGELO CAMMUE, BRUNO PHILIPPE;
MARTINS JUNIOR, RONALDO BRAGANCA;
ARRUDA, EURICO;
FACCIOLI, LUCIA HELENA;
TYTGAT, JAN;
ARANTES, ELIANE CANDIANI.
Non-disulfide-bridged peptides from Tityus serrulatus venom: Evidence for proline-free ACE-inhibitors.
Peptides,
v. 82,
p. 44-51,
AUG 2016.
Citações Web of Science: 5.
CERNI, FELIPE AUGUSTO;
PUCCA, MANUELA BERTO;
AMORIM, FERNANDA GOBBI;
FIGUEIREDO BORDON, KARLA DE CASTRO;
ECHTERBILLE, JULIEN;
QUINTON, LOIC;
DE PAUW, EDWIN;
PEIGNEUR, STEVE;
TYTGAT, JAN;
ARANTES, ELIANE CANDIANI.
Isolation and characterization of Ts19 Fragment II, a new long-chain potassium channel toxin from Tityus serrulatus venom.
Peptides,
v. 80,
p. 9-17,
JUN 2016.
Citações Web of Science: 11.
PUCCA, MANUELA BERTO;
CEMI, FELIPE AUGUSTO;
PINHEIRO JUNIOR, ERNESTO LOPES;
FIGUEIREDO BORDON, KARLA DE CASTRO;
AMORIM, FEMANDA GOBBI;
CORDEIRO, FRANCIELLE ALMEIDA;
LONGHIM, HELOISA TAVONI;
CREMONEZ, CAROLINE MARRONI;
OLIVEIRA, GUILHERME HONDA;
ARANTES, ELIANE CANDIANI.
Tityus serrulatus venom - A lethal cocktail.
Toxicon,
v. 108,
p. 272-284,
DEC 15 2015.
Citações Web of Science: 27.
PUCCA, MANUELA BERTO;
AMORIM, FERNANDA GOBBI;
CERNI, FELIPE ATIGUSTO;
FIGUEIREDO BORDON, KARLA DE CASTRO;
CARDOSO, IARA AIME;
PINO ANJOLETTE, FERNANDO ANTONIO;
ARANTES, ELIANE CANDIANI.
Influence of post-starvation extraction time and prey-specific diet in Tityus serrulatus scorpion venom composition and hyaluronidase activity.
Toxicon,
v. 90,
p. 326-336,
NOV 2014.
Citações Web of Science: 19.