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Avaliação da virulência e expressão gênica diferencial in vivo de Salmonella enterica mutantes para proteínas associadas ao nucleóide

Processo: 12/05382-6
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de junho de 2012
Vigência (Término): 29 de fevereiro de 2016
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
Pesquisador responsável:Marcelo Brocchi
Beneficiário:Guilherme Paier Milanez
Instituição-sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
Assunto(s):Regulação da expressão gênica   Microbiologia médica

Resumo

Salmonella enterica é um bacilo Gram-negativo anaeróbico facultativo pertencente à família Enterobacteriaceae responsável por grandes perdas econômicas e sofrimento humano, podendo causar doenças ao homem, que variam de gastroenterites a infecções sistêmicas, e em animais, provocando grandes perdas econômicas. Há aproximadamente 20 anos atrás a sorovariedade Enteritidis se tornou a sorovariedade mais presente nos casos de salmonelose no Brasil, Europa e Estados Unidos, tendo como principal fonte da infecção ovos e outros produtos derivados do frango. Uma das formas de se controlar infecções por S. enterica é através do uso de vacinas, que já tem sido utilizada em diversos países, apesar de ainda haver necessidade de melhora destas. Dados recentes de nosso grupo indicam que mutantes nulos de S. enterica Typhimurium para genes codificadores de Naps (nucleoid-associated proteins), são atenuados quanto à virulência e capazes de induzir proteção no modelo murino de infecção. As patentes referentes ao desenvolvimento destas linhagens já foram ou estão sendo submetidas ao INPI. Baseados em dados recentes de nosso grupo com S. enterica Typhimurium, neste projeto propomos a construção de mutantes de S. enterica Enteritidis para os genes hupA e hupB, além do duplo-mutante hupAhupB, através do sistema de recombinação homóloga » Red, e a caracterização destes mutantes com relação a atenuação da virulência e da resposta imune gerada no modelo murino de infecção. Estes são genes histona-like que atuam de forma global na expressão gênica, portanto será feita uma análise das diferenças do perfil de expressão gênica dos mutantes novos de S. Enteritidis, assim como dos previamente construídos em S. Typhimurium, através da técnica de RNA-seq, e os dados serão validados por RT-PCR. Com isso esperamos obter dados importantes que evidenciem as diferenças genéticas entre as linhagens, e que reflitam na diferença entre seus mecanismos de patogenicidade.

Publicações científicas (5)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
MILANEZ, GUILHERME P.; WERLE, CATIERINE H.; AMORIM, MARIENE R.; RIBEIRO, RAFAEL A.; TIBO, LUIZ H. S.; ROQUE-BARREIRA, MARIA CRISTINA; OLIVEIRA, ALINE F.; BROCCHI, MARCELO. HU-Lacking Mutants of Salmonella enterica Enteritidis Are Highly Attenuated and Can Induce Protection in Murine Model of Infection. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 9, AUG 22 2018. Citações Web of Science: 0.
LEITE, BRUNA; WERLE, CATIERINE HIRSCH; DO CARMO, CAMILA PINHEIRO; NOBREGA, DIEGO BORIN; MILANEZ, GUILHERME PAIER; CULLER, HEBERT FABRICIO; SIRCILI, MARCELO PALMA; ALVAREZ-MARTINEZ, CRISTINA E.; BROCCHI, MARCELO. Integration host factor is important for biofilm formation by Salmonella enterica Enteritidis. PATHOGENS AND DISEASE, v. 75, n. 6 AUG 2017. Citações Web of Science: 3.
WERLE, CATIERINE HIRSCH; DAMIANI, IGOR; MILANEZ, GUILHERME PAIER; FARIAS, ALESSANDRO S.; CINTRA GOMES MARCONDES, MARIA CRISTINA; CULLER, HEBERT FABRICIO; SIRCILI, MARCELO PALMA; LEITE, BRUNA; BROCCHI, MARCELO. Antimelanoma effect of Salmonella Typhimurium integration host factor mutant in murine model. FUTURE ONCOLOGY, v. 12, n. 20, p. 2367-2378, OCT 2016. Citações Web of Science: 0.
MILANEZ, GUILHERME PAIER; NASCIMENTO, LEANDRO COSTA; TIRABASSI, ADRIANE HOLTZ; ZUANAZE, MARCELO; RODRIGUES, DALIA PRAZERES; GUIMARAES PEREIRA, GONCALO AMARANTE; BROCCHI, MARCELO. Whole-Genome Sequence of Salmonella enterica Serovar Enteritidis Phage Type 4, Isolated from a Brazilian Poultry Farm. MICROBIOLOGY RESOURCE ANNOUNCEMENTS, v. 4, n. 3 MAY-JUN 2016. Citações Web of Science: 2.
TOMIYAMA, M. P. O.; WERLE, C. H.; MILANEZ, G. P.; NOBREGA, D. B.; PEREIRA, J. P.; CALARGA, A. P.; FLORES, F.; BROCCHI, M. Salmonella enterica Typhimurium fljBA operon stability: implications regarding the origin of Salmonella enterica I 4,[5], 12:i:-. Genetics and Molecular Research, v. 14, n. 4, p. 19057-19065, 2015. Citações Web of Science: 0.
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
MILANEZ, Guilherme Paier. Desenvolvimento e avaliação da virulência e potencial vacinal de mutantes de Salmonella enterica para "nucleoid-associated proteins". 2016. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia.

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