Observando a ligação de cálcio do complexo troponina C-troponina I utilizando as técnicas de fluorescência e diálise de fluxo

• Processo: 98/14589-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Aperfeiçoamento
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 1999
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 1999
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Fernando de Castro Reinach
• Beneficiário: Anna Victoria Rotberg
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 95/04527-3 - Regulação da contração muscular: mutantes sítio-dirigidos dos componentes do sistema contrátil de músculo e sua análise, AP.TEM
• Assunto(s): 5-Hidroxitriptofano Cálcio Contração muscular Fluorescência Troponina
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Calcio | Contracao Muscular | Dialise De Fluxo | Fluorescencia | Troponina | 5-Hidroxitriptofano

Resumo

A contração muscular é um processo altamente regulado, o qual é sensível às concentrações de cálcio intracelulares. O complexo troponina é um grupo de três proteínas - Troponina I (Tnl) e Troponina C (TnC) - as quais são responsáveis por este sistema regulatório. Pretendemos expressar e purificar duas das proteínas deste complexo: a Tnl, e a TnC, que liga cálcio. O sistema de expressão utiliza cepas de E. coli e vetores pET, os quais nos permitem a expressar tanto a Tnl tipo selvagem quanto uma TnC modificada - TnC(F29WH). Esta modificação é necessária para que poderemos estudar o complexo Tnl-TnC através de espectroscopia de fluorescência, e também diálise de fluxo. Assim, pretendemos realizar titulações com cálcio, as quais nos dará dados sobre a ligação de cálcio na TnC(F29WH), e co comportamento do complexo Tnl-TnC(F29WH) nesta situação. (AU)