Análise e padronização de uma nova metodologia de extração, distinção e quantificação dos glicosaminoglicanos sulfatados da cartilagem articular do joelho de ratos

• Processo: 12/08290-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2012
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2013
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: Flavio Faloppa
• Beneficiário: Bruno Goncalves Pereira Paschoa
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Cartilagem articular Osteoartrite do joelho Metodologia científica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cartilagem Articular | Distinção e Quantificação | Extração | Extraction | Glicosaminoglicanos Sulfatados | Joint Cartilage | Methodology | Metodologia | Osteoartrite | Ostheoarthritis | Quantification and Distinction | Sulfated Glycosaminoglycans | Medicina, Biologia Molecular

Resumo

A proposta deste estudo visa à padronização e análise de uma nova metodologia de extração, distinção e quantificação de glicosaminoglicanos. A análise dos glicosaminoglicanos (GAGs) componentes da cartilagem articular é um processo essencial no entendimento das doenças e farmacologia relacionadas a esse tecido e bem como na compreensão das alterações geradas por estresse mecânico excessivo, privação de carga, imobilização e até mesmo cargas fisiológicas. Os métodos mais utilizados de avaliação dos GAGs da cartilagem articular são o sistema de Mankin ou HHGS- Histological-Histochemical Grading System e a classificação OARSI - Ostheoarthritis Research Society International. Apesar de bem estabelecidas, ambas as classificações contam com a graduação subjetiva da intensidade da coloração determinada pelo examinador, além disso, esses métodos também não distinguem os GAGs nem quantificam-nos individualmente, sendo, portanto, de grande valor a padronização de uma nova metodologia de extração, distinção e quantificação desses elementos na cartilagem articular. Para o presente estudo serão utilizados ratos divididos em dois grupos, o grupo controle (GC) e o grupo treinamento (GT), com período de treinamento de 36 dias. Ao final do período, ambos os grupos serão sacrificados para ser realizada a padronização da extração da cartilagem em cinco cortes, para posterior análise eletroforética com melhora da degradação enzimática pela ²-eliminação, e através da eletroforese em gel de agarose, será possível a identificação dos GAGs, separando-os de acordo com o tampão utilizado para posterior quantificação por densitometria. (AU)