| Processo: | 12/07750-2 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |
| Vigência (Início): | 01 de outubro de 2012 |
| Vigência (Término): | 30 de setembro de 2015 |
| Área do conhecimento: | Ciências da Saúde - Medicina |
| Pesquisador responsável: | Luiz Carlos de Mattos |
| Beneficiário: | Fabiana Nakashima |
| Instituição Sede: | Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto (FAMERP). Secretaria de Desenvolvimento Econômico (São Paulo - Estado). São José do Rio Preto , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Toxoplasmose Medicina transfusional Toxoplasma gondii Transfusão de sangue |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | hemocomponentes | Toxoplasma gondii | toxoplasmose | Transfusão de sangue | Medicina Transfusional |
Resumo Introdução. A infecção por Toxoplasma gondii, agente etiológico da toxoplasmose, apresenta distribuição mundial e acomete humanos de todas as etnias e idade. A disseminação da infecção pode se dar de diferentes formas, incluindo a transfusão de hemocomponentes. Em indivíduos imunocompetentes este parasito não oferece grandes riscos, porém em indivíduos imunocomprometidos o acometimento pode ser grave e pode apresentar alta taxa de mortalidade. Objetivos. O objetivo geral deste projeto é detectar com o uso de métodos sorológicos e caracterizar com o uso de métodos moleculares a infecção por T. gondii em doadores de sangue. Seus objetivos específicos compreendem: 1. Realizar a triagem sorológica para anticorpos anti-T. gondii (IgM e IgG) em candidatos aptos à doação de sangue e identificar os perfis [(IgM não reagente; IgG não reagente); (IgM reagente; IgG não reagente); (IgM reagente; IgG reagente); (IgM não reagente; IgG reagente)]. 2. Verificar a presença de DNA genômico de T. gondii no sangue periférico dos doadores com o uso do métodos amplificação gênica (PCR convencional e PCR em tempo real). 3. Caracterizar, nos doadores com PCR positivo, os genótipos de T. gondii com o uso dos marcadores moleculares. Material e métodos. Serão selecionados 700 doadores de sangue aptos à doação no Hemocentro de São José do Rio Preto, Estado de São Paulo. Para cada doador será preenchida uma ficha de dados epidemiológicos e serão colhidas duas amostras de sangue periférico no momento da doação. Uma será utilizada para a pesquisa de anticorpos (IgM e IgG) anti-T. gondii, com o uso do método ELISA. A outra será utilizada para a extração do DNA genômico com o uso de kits comerciais. A amplificação gênica do T. gondii será realizada por PCR convencional (cnPCR) e PCR em tempo real (qPCR). As amostras com resultado positivo por PCR (ambos) serão genotipadas com o uso dos marcadores SAG1, SAG2 (50-and 30-SAG2, alt.SAG2) SAG3, BTUB, GRA6, C22-8, c29-2, L358, PK1 and Apico. Conforme o perfil sorológico, obtido a partir do método de ELISA, os doadores de sangue serão separados em quatro grupos (G1, G2, G3 e G4). No G1 serão incluídos os doadores com perfil sorológicos IgM e IgG não reagentes. Em G2, serão incluídos aqueles com IgM e IgG reagente; em G3, aqueles IgM reagente e IgG não reagente; e G4 IgM não reagente e IgG reagente. Todos esses grupos serão confrontados com o resultado do PCR para T. gondii. Os resultados obtidos e os PCR serão comparados entre si pelo X2 ou pelo teste exato de Fisher. Também será calculado o OddsRatio. Resultados esperados. Espera-se que os resultados a serem alcançados com este projetocontribuam para conhecer se o T. gondii circula no sangue periférico de doadores e que permitamestimar que riscos a presença de tal parasito oferece aos pacientes que necessitam de transfusão de hemocomponentes. | |
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