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Investigação sorológica e molecular de Toxoplasma gondii em doadores de sangue

Processo: 12/07750-2
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de outubro de 2012
Vigência (Término): 30 de setembro de 2015
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina
Pesquisador responsável:Luiz Carlos de Mattos
Beneficiário:Fabiana Nakashima
Instituição-sede: Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto (FAMERP). Secretaria de Desenvolvimento Econômico (São Paulo - Estado). São José do Rio Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Toxoplasmose   Medicina transfusional   Toxoplasma gondii   Transfusão de sangue

Resumo

Introdução. A infecção por Toxoplasma gondii, agente etiológico da toxoplasmose, apresenta distribuição mundial e acomete humanos de todas as etnias e idade. A disseminação da infecção pode se dar de diferentes formas, incluindo a transfusão de hemocomponentes. Em indivíduos imunocompetentes este parasito não oferece grandes riscos, porém em indivíduos imunocomprometidos o acometimento pode ser grave e pode apresentar alta taxa de mortalidade. Objetivos. O objetivo geral deste projeto é detectar com o uso de métodos sorológicos e caracterizar com o uso de métodos moleculares a infecção por T. gondii em doadores de sangue. Seus objetivos específicos compreendem: 1. Realizar a triagem sorológica para anticorpos anti-T. gondii (IgM e IgG) em candidatos aptos à doação de sangue e identificar os perfis [(IgM não reagente; IgG não reagente); (IgM reagente; IgG não reagente); (IgM reagente; IgG reagente); (IgM não reagente; IgG reagente)]. 2. Verificar a presença de DNA genômico de T. gondii no sangue periférico dos doadores com o uso do métodos amplificação gênica (PCR convencional e PCR em tempo real). 3. Caracterizar, nos doadores com PCR positivo, os genótipos de T. gondii com o uso dos marcadores moleculares. Material e métodos. Serão selecionados 700 doadores de sangue aptos à doação no Hemocentro de São José do Rio Preto, Estado de São Paulo. Para cada doador será preenchida uma ficha de dados epidemiológicos e serão colhidas duas amostras de sangue periférico no momento da doação. Uma será utilizada para a pesquisa de anticorpos (IgM e IgG) anti-T. gondii, com o uso do método ELISA. A outra será utilizada para a extração do DNA genômico com o uso de kits comerciais. A amplificação gênica do T. gondii será realizada por PCR convencional (cnPCR) e PCR em tempo real (qPCR). As amostras com resultado positivo por PCR (ambos) serão genotipadas com o uso dos marcadores SAG1, SAG2 (50-and 30-SAG2, alt.SAG2) SAG3, BTUB, GRA6, C22-8, c29-2, L358, PK1 and Apico. Conforme o perfil sorológico, obtido a partir do método de ELISA, os doadores de sangue serão separados em quatro grupos (G1, G2, G3 e G4). No G1 serão incluídos os doadores com perfil sorológicos IgM e IgG não reagentes. Em G2, serão incluídos aqueles com IgM e IgG reagente; em G3, aqueles IgM reagente e IgG não reagente; e G4 IgM não reagente e IgG reagente. Todos esses grupos serão confrontados com o resultado do PCR para T. gondii. Os resultados obtidos e os PCR serão comparados entre si pelo X2 ou pelo teste exato de Fisher. Também será calculado o OddsRatio. Resultados esperados. Espera-se que os resultados a serem alcançados com este projetocontribuam para conhecer se o T. gondii circula no sangue periférico de doadores e que permitamestimar que riscos a presença de tal parasito oferece aos pacientes que necessitam de transfusão de hemocomponentes.

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Publicações científicas (5)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
MURATA, FERNANDO HENRIQUE ANTUNES; PREVIATO, MARIANA; FREDERICO, FABIO BATISTA; BARBOSA, AMANDA PIRES; NAKASHIMA, FABIANA; DE FARIA, JR., GERALDO MAGELA; SILVEIRA CARVALHO, APARECIDA PERPETUO; MEIRA STREJEVITCH, CRISTINA DA SILVA; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; CASTIGLIONI, LILIAN; et al. Evaluation of Serological and Molecular Tests Used for the Identification of Toxoplasma gondii Infection in Patients Treated in an Ophthalmology Clinic of a Public Health Service in Sao Paulo State, Brazil. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 9, . (12/07716-9, 12/07750-2, 14/05302-8, 18/04709-8, 18/09448-8, 13/15879-8, 13/10050-5)
FERREIRA, A. I. C.; BRANDAO DE MATTOS, C. C.; FREDERICO, F. B.; MEIRA, C. S.; ALMEIDA, JR., G. C.; NAKASHIMA, F.; BERNARDO, C. R.; PEREIRA-CHIOCCOLA, V. L.; DE MATTOS, L. C.. Risk factors for ocular toxoplasmosis in Brazil. EPIDEMIOLOGY AND INFECTION, v. 142, n. 1, p. 142-148, . (12/07750-2, 09/09168-6, 12/05580-2, 09/17540-2, 11/13939-8)
NAKASHIMA, FABIANA; BRANDAO DE MATTOS, CINARA CASSIA; COSTA FERREIRA, ANA IARA; JUNQUEIRA FRANCO SPERGIORIN, LIGIA COSENTINO; MEIRA-STREJEVITCH, CRISTINA SILVA; OLIANI, ANTONIO HELIO; MOS VAZ-OLIANI, DENISE CRISTINA; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; DE MATTOS, LUIZ CARLOS. FUT3 and FUT2 genotyping and glycoconjugate profile Lewis(b) as a protective factor to Toxoplasma gondii infection. Acta Tropica, v. 193, p. 92-98, . (09/17540-2, 08/09311-0, 12/07750-2, 09/09168-6)
NAKASHIMA, FABIANA; PARDO, VALQUIRIA SOUSA; MIOLA, MARCOS PAULO; ANTUNES MURATA, FERNANDO HENRIQUE; PADUAN, NATALIA; LONGO, STEFANI MIQUELINE; BRANDAO DE MATTOS, CINARA CASSIA; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; RICCI, OCTAVIO; DE MATTOS, LUIZ CARLOS. Serum IgG Anti-Toxoplasma gondii Antibody Concentrations Do Not Correlate Nested PCR Results in Blood Donors. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 9, . (12/07716-9, 12/07750-2, 13/15879-8, 14/00900-4, 11/13939-8)
ANTUNES MURATA, FERNANDO HENRIQUE; FERREIRA, MARINA NEVES; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; JUNQUEIRA FRANCO SPEGIORIN, LIGIA COSENTINO; MEIRA-STREJEVITCH, CRISTINA DA SILVA; GAVA, RICARDO; SILVEIRA-CARVALHO, APARECIDA PERPETUO; DE MATTOS, LUIZ CARLOS; BRANDAO DE MATTOS, CINARA CASSIA; GRP, FAMERP TOXOPLASMA RES. Evaluation of serological and molecular tests used to identify Toxoplasma gondii infection in pregnant women attended in a public health service in Sao Paulo state, Brazil. DIAGNOSTIC MICROBIOLOGY AND INFECTIOUS DISEASE, v. 89, n. 1, p. 13-19, . (14/01706-7, 12/07716-9, 12/07750-2, 14/05302-8, 13/15879-8, 14/09496-1)

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