Caracterização estrutural de proteínas com ação em canais iônicos por espectrometria de massas

• Processo: 12/16148-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Pesquisa
• Data de Início da vigência: 24 de setembro de 2012
• Data de Término da vigência: 01 de dezembro de 2012
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Farmácia - Análise Toxicológica
• Pesquisador responsável: Eliane Candiani Arantes Braga
• Beneficiário: Eliane Candiani Arantes Braga
• Pesquisador Anfitrião: Edwin de Pauw
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Université de Liège (ULg), Bélgica
• Assunto(s): Proteômica Proteínas Análise de sequência de DNA Espectrometria de massas Canais iônicos Peptídeos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Analise Estrutural | Espectrometria de massas | Padrão de pontes dissulfeto | Sequenciamento de proteínas | Análise estrutural de proteínas

Resumo

Numerosos estudos realizados com peçonhas animais elucidaram a estrutura e o papel funcional de muitos de seus componentes e evidenciaram a complexa natureza das peçonhas em ambos os aspectos. Os principais constituintes da peçonha de escorpião são peptídeos e proteínas com ação em canais iônicos (canais para Na+ ou K+) e ensaios de espectrometria de massas aplicados à análise proteômica, utilizando MALDI (matrix-assisted laser desorption-ionization) e ESI (electrospray ionization) como tecnologias de ionização suaves, tem permitido grandes avanços no estudo de componentes proteicos de peçonhas. Atualmente, a espectrometria de massa utilizando fontes de ionização suaves é o método de escolha para o sequenciamento de peptídeos e proteínas. Depois de ionizados, os peptídeos são comumente sequenciados por espectrometria de massa em tandem. As ligações dissulfeto são quimicamente reduzidas e alquiladas antes da digestão enzimática das amostras. O presente projeto propõe um estágio no Laboratório do Prof. Edwin De Pauw (Mass Spectrometry Laboratory, Liege University, Bélgica) onde técnicas de espectrometria de massas são usadas para a caracterização estrutural de proteínas e peptídeos, entre outros compostos. A tecnologia será transferida para o Laboratório de Toxinas animais, do qual sou responsável, tornando a tecnologia disponível aqui na FCFRP-USP, que já possui uma central de Espectrometria de Massas. O objetivo deste projeto é aprender a usar a espectrometria de massas para a caracterização estrutural de proteínas e peptídeos, com especial atenção para aqueles com ação em canais iônicos, que são alvos de vários estudos do Laboratório de Toxinas Animais. Para alcançar estes objetivos, serão realizados ensaios de espectrometria de massas para determinar a massa molar de peptídeos e proteínas da peçonha de escorpião; a sequência de novo de peptídeos; pontes dissulfeto e amidação na região C-terminal. (AU)