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Desenvolvimento de técnicas de RT-PCR em tempo real para arbovírus causadores de doença humana e identificação destes com base na sequência nucleotídica

Processo: 12/02836-6
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de novembro de 2012
Vigência (Término): 31 de agosto de 2014
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
Pesquisador responsável:Luiz Tadeu Moraes Figueiredo
Beneficiário:Marilia Farignoli Romeiro
Instituição-sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Phlebovirus   Reação em cadeia da polimerase em tempo real   Alphavirus   Orthobunyavirus   Flavivirus

Resumo

Os arbovírus relacionados as famílias Flaviviridae, Togaviridae e Bunyaviridae compreendem graves problemas de saúde pública em países tropicais e subtropicais. Estas arboviroses geralmente sub-diagnosticadas, envolvem manifestações clínicas que vão de infecção assintomática, doença febril aguda a febre hemorrágica viral e encefalites. Os arbovírus são mantidos na natureza através de ciclo que compreendem hospedeiros naturais (amplificadores) que são as aves, mamíferos e alguns répteis, e como vetores, mosquitos do gênero Aedes sp., Culex sp., Sabethes sp. e Psorophora sp., que por vezes estes podem transmitir estas viroses aos hospedeiros acidentais como os seres humanos, equinos e outros mamíferos. As metodologias empregadas no diagnóstico das infecções por arbovírus têm como base testes sorológicos, como o ELISA, e virológicos. Com o advento das técnicas moleculares, a reação em cadeia da polimerase (PCR) tem sido largamente empregado no diagnostico das infecções por arbovírus. A técnica de RT-PCR em tempo real provém vantagens sobre a técnica de PCR convencional por apresentar rapidez, alta sensibilidade e especificidade, ainda permite a quantificação da carga viral das amostras, sendo importante para estudar a patogênese destas arboviroses. O presente estudo objetiva o desenvolvimento de uma técnica de RT-PCR em tempo real utilizando SYBR Green para detecção de arbovírus causadores de doença humana e investigar após o seqüenciamento nucleotídico a possível presença de Flavivirus, Alphavirus, Phlebovirus e Orthobunyavirus nas amostras analisadas.

Publicações científicas (5)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ROMEIRO, MARILIA FARIGNOLI; DE SOUZA, WILLIAM MARCIEL; TOLARDO, ALINE LAVADO; VIEIRA, LUIZ CARLOS; HENRIQUES, DYANA ALVES; DE ARAUJO, JANSEN; HASSEGAWA SIQUEIRA, CARLOS EDUARDO; COLOMBO, TATIANA ELIAS; AQUINO, VICTOR HUGO; LOPES DA FONSECA, BENEDITO ANTONIO; DE MORAIS BRONZONI, ROBERTA VIEIRA; NOGUEIRA, MAURICIO LACERDA; DURIGON, EDISON LUIZ; MORAES FIGUEIREDO, LUIZ TADEU. A real-time RT-PCR for rapid detection and quantification of mosquito-borne alphaviruses. ARCHIVES OF VIROLOGY, v. 161, n. 11, p. 3171-3177, NOV 2016. Citações Web of Science: 1.
ALINE LAVADO TOLARDO; WILLIAM MARCIEL DE SOUZA; MARILIA FARIGNOLI ROMEIRO; LUIZ CARLOS VIEIRA; LUCIANO KLEBER DE SOUZA LUNA; DYANA ALVES HENRIQUES; JANSEN DE ARAUJO; CARLOS EDUARDO HASSEGAWA SIQUEIRA; TATIANA ELIAS COLOMBO; VICTOR HUGO AQUINO; BENEDITO ANTONIO LOPES DA FONSECA; ROBERTA VIEIRA DE MORAIS BRONZONI; MAURÍCIO LACERDA NOGUEIRA; EDISON LUIZ DURIGON; LUIZ TADEU MORAES FIGUEIREDO. A real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction for detection and quantification of Vesiculovirus. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, v. 111, n. 6, p. 385-390, Jun. 2016. Citações Web of Science: 2.
ROMEIRO, MARILIA FARIGNOLI; DE SOUZA, WILLIAM MARCIEL; TOLARDO, ALINE LAVADO; VIEIRA, LUIZ CARLOS; COLOMBO, TATIANA ELIAS; AQUINO, VICTOR HUGO; NOGUEIRA, MAURICIO LACERDA; MORAES FIGUEIREDO, LUIZ TADEU. Evaluation and optimization of SYBR Green real-time reverse transcription polymerase chain reaction as a tool for diagnosis of the Flavivirus genus in Brazil. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 49, n. 3, p. 279-285, MAY-JUN 2016. Citações Web of Science: 2.
MOTTA MAIA, FELIPE GONCALVES; CHAVEZ, JULIANA HELENA; DE SOUZA, WILLIAM MARCIEL; ROMEIRO, MARILIA FARIGNOLI; DE CASTRO-JORGE, LUIZA ANTUNES; LOPES DA FONSECA, BENEDITO ANTONIO; MORAES FIGUEIREDO, LUIZ TADEU. Infection with Saint Louis encephalitis virus in the city of Ribeirao Preto, Brazil: report of one case. INTERNATIONAL JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES, v. 26, p. 96-97, SEP 2014. Citações Web of Science: 6.
SILVA, JAQUELINE RAYMONDI; ROMEIRO, MARILIA FARIGNOLI; DE SOUZA, WILLIAM MARCIEL; MUNHOZ, THIAGO DEMARCHI; BORGES, GUSTAVO PUIA; BRIOSCHI SOARES, OTAVIO AUGUSTO; COELHO DE CAMPOS, CARLOS HENRIQUE; MACHADO, ROSANGELA ZACARIAS; CRISTINY RODRIGUES SILVA, MARIA LUANA; MAIA FARIA, JOICE LARA; CHAVEZ, JULIANA HELENA; MORAES FIGUEIREDO, LUIZ TADEU. A Saint Louis encephalitis and Rocio virus serosurvey in Brazilian horses. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 47, n. 4, p. 414-417, JUL-AUG 2014. Citações Web of Science: 10.

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