Estudos bioquímicos e moleculares dos componentes mitocondriais em Aspergillus fumigatus: Clonagem e expressão heteróloga de umTransportador de NAD+/NADH

• Processo: 12/15861-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Vigência (Início): 01 de novembro de 2012
• Vigência (Término): 30 de junho de 2014
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Sergio Akira Uyemura
• Beneficiário: Laís de Lourdes de Lima Bálico
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Mitocôndrias Aspergillus fumigatus Bioenergética
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aspergillus fumigatus | mitocôndria | Nadh | transportador NAD | Bioenergética

Resumo

Nos últimos dez anos, nosso laboratório tem estudado a bioenergética mitocondrial do fungo Aspergillus fumigatus. Nós demonstramos a presença de componentes clássicos da cadeia respiratória (ou via do citocromo c) neste microrganismo. Além disso, este fungo apresenta componentes alternativos como a NADH desidrogenase alternativa, oxidase alternativa e uma proteína desacopladora-like. Ainda, além da entrada de NADH para cadeia respiratória pela NADH desidrogenase clássica e pela alternativa, estudos tem identificado e caracterizado duas isoformas mitocondriais do transportador de NAD+ em Arabidopsis thaliana (Ndt1p e Ndt2p, respectivamente). Em estudos prévios no nosso laboratório, foi observato que em mitocondrias de Paracoccidioides brasiliensis, o potencial de membrana mitocondrial podia ser induzido por NAD+ e dissipado pelo desacoplador FCCP, sugerindo a presença de um transportador de NAD+, como o descrito para S. cerevisiae. Outros experimentos foram realizados com mitocondrias de A. fumigatus e também suberiram a presença deste transportador nesse organismo. Utilizando-se ferramentas de bioinformática, nós encontramos uma sequencia no genoma de A. fumigatus, com 32% de identidade com o gene transportado de nicotinamida dinucleotídeo (ndt1p) de S. cerevisiae. O objetivos deste projeto é clonar, sequenciar e expressar em organismo heterológo o gene nd1p-like de A. fumigatus em mutantes de S. cerevisiae (Dndt1Dndt2).

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DE LIMA BALICO, LAIS DE LOURDES; SANTOS, EMERSON DE SOUZA; SUZUKI-HATANO, SILVELI; SOUSA, LUCAS OLIVEIRA; CALEIRO SEIXAS AZZOLINI, ANA ELISA; LUCISANO-VALIM, YARA MARIA; DINAMARCO, TAISA MAGNANI; KANNEN, VINICIUS; UYEMURA, SERGIO AKIRA. Heterologous expression of mitochondrial nicotinamide adenine dinucleotide transporter (Ndt1) from Aspergillus fumigatus rescues impaired growth in Delta ndt1 Delta ndt2 Saccharomyces cerevisiae strain. Journal of Bioenergetics and Biomembranes, v. 49, n. 6, p. 423-435, DEC 2017. (12/15861-9, 13/20031-8)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

BÁLICO, Laís de Lourdes de Lima. Caracterização molecular e bioquímica de um transportador mitocondrial de nicotinamida adenina dinucleotídeo de Aspergillus fumigatus. 2014. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (PCARP/BC) Ribeirão Preto.