Estudo da expressão do gene CYP21A2 e da atividade enzimática da 21-hidroxilase resultantes de mutações raras em casos de hiperplasia da adrenal congênita nas formas clássica e tardia

• Processo: 12/21260-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2012
• Data de Término da vigência: 30 de abril de 2013
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Maricilda Palandi de Mello
• Beneficiário: Larissa Magalhães Grimaldi
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 11/51808-2 - Estudo da expressao do gene cyp21a2 e da atividade enzimatica da 21-hidroxilase resultante de mutacoes raras em casos de hyperplasia da adrenal congenita nas formas classica e tardia., AP.R
• Assunto(s): Técnicas e procedimentos diagnósticos Mutação Esteroide 21-hidroxilase
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Deficiência de 21-hidroxilase | gene CYP21A2 | HCA forma tardia | Endocrinologia Pediátrica

Resumo

O laboratório de Genética Molecular Humana do Centro do CBMEG-UNICAMP estuda há tempos as causas moleculares de hiperplasia adrenal. Várias técnicas para o estudo de mutações no gene CYP21A2 foram adotadas ao longo dos anos. Atualmente, a estratégia adotada é de sequenciar diretamente o gene, caso o padrão da segregação das mutações sugira deleção ou conversão em larga escala, procede-se uma caracterização destas alterações por Southern blot ou MLPA. Para uma descrição adequada da mutação e estabelecimento da correlação fenótipo-genótipo, nos casos de variações nucleotídicas novas há necessidade de comprovação do grau de alteração produzido no processo de expressão gênica ou na atividade enzimática dependendo do tipo de mutação. Neste projeto estudaremos grupos de pacientes da forma clássica e não-clássica do Triângulo Mineiro, do Rio de Janeiro, de São Paulo (capital - atendidos na Santa Casa) e do nordeste, além daqueles atendidos no ambulatório da UNICAMP que, inclusive, recebe pacientes do sul de Minas Gerais. O objetivo é apresentar dados concretos em defesa ou em oposição à questão do defeito fundador das mutações recorrentes inclusive discutindo a relação da maior frequência de uma determinada mutação com a origem das populações de cada região. O estudo incluirá já de imediato 9 mutações ou combinações de mutações novas identificadas recentemente no gene CYP21A2 em pacientes com a deficiência de 21-hidroxilase tanto na forma clássica como na não clássica, além de 5 trocas nucleotídicas raras em íntrons e uma combinação de trocas nucleotídicas no íntron 2. Já na região 5' promotora, investigaremos 4 alterações isoladas e 2 combinações de trocas nucleotídicas diferentes. Esta alterações na região 5' promotora estão localizadas fora do promotor mínimo já testados em outros trabalhos. Trata-se de um trabalho de grande importância e relevância para o diagnóstico molecular das deficiências aqui incluídas no sentido de proporcionar não só o diagnóstico molecular, mas também oferecer de forma mais acurada o aconselhamento genético e diagnóstico pré-natal para as famílias envolvidas. Sua relevância se ressalta inclusive por representar apoio à formação de profissionais especializados em vários níveis: treinamento técnico, iniciação científica, mestrado e doutorado. A importância desse treinamento assume uma nova dimensão no momento atual em que a triagem neonatal para hiperplasia adrenal está prestes a ser implantada no âmbito nacional no Brasil. Assim, a difusão do conhecimento profundo da estrutura do gene CYP21A2 e de como trocas nucleotídicas podem alterar seu funcionamento normal será fundamental para se avaliar o prognóstico de casos com dosagens de 17-hidroxiprogesterona fora dos limites da normalidade. (AU)