Caracterizacao de tres fatores de transcricao pertencentes a familia lysr de xulella fastidiosa.

• Processo: 11/50268-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2013
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Agronomia - Fitotecnia
• Pesquisador responsável: Anete Pereira de Souza
• Beneficiário: André da Silva Santiago
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Expressão de proteínas Clorose variegada dos citros
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cvc | Expressao Proteica | Fitopatogenicidade | Xylela Fastidiosa

Resumo

Desde o seqüenciamento do genoma da Xylella fastidiosa linhagem 9a5c, houve um grande aumento de informações relacionadas a fisiologia e patogenia deste microrganismo, porém muita das proteínas produzidas por esta bactéria ainda não apresentam funções preditas. Sendo assim, este trabalho tem como objetivo caracterizar estrutural e funcionalmente três proteínas: XfCysB (orf Xf0683), XfLysRL (orf Xf1448) e XfycjZ (orf Xf1480). Essas proteínas apresentam alta similaridade com membros da família de reguladores transcricionais do tipo LysR (LTTR). Os LTTR constituem uma família de reguladores que apresentam funções diversas: regulação de genes envolvidos no metabolismo, divisão celular, quorum sense, formação de biofilme, virulência, entre outros. Dentre as proteínas em estudo, a única proteína que possui predição de classificação mais específica dentro da família LysR é a XfCysB, cujas proteínas homólogas estão envolvidas na biossíntese de cisteína. A caracterização estrutural será compreendida por ensaios como Dicroísmo Circular (CD) e Cromatografia de Exclusão por Peso Molecular, enquanto que a funcional compreenderá a produção de anticorpos para as proteína e realização de Western blot dos anticorpos contra o biofilme de X. fastidiosa. A expressão dos genes que codificam as três proteínas será verificada por PCR quantitativo durante as diferentes fases da formação de biofilme e relacionado à expressão protéica. Esses estudos de expressão gênica das proteínas em diferentes fases do biofilme abrirão uma perspectiva funcional do papel deste regulador no desenvolvimento do biofilme de Xylella. Estudos recentes de expressão global de genes desenvolvidos pelo grupo do Centro APTA Citros, demonstraram que genes da família LysR estão envolvidos com a regulação de genes associados a resposta a cobre, mas não a tetraciclina. Desta forma este estudo visa também avaliar em qual fase da formação de biofilme os genes e as respectivas proteínas da família LysR são ativados na presença de cobre. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MENDES, JULIANO S.; SANTIAGO, ANDRE DA S.; TOLEDO, MARCELO A. S.; ROSSELLI-MURAI, LUCIANA K.; FAVARO, MARIANNA T. P.; SANTOS, CLELTON A.; HORTA, MARIA AUGUSTA C.; CRUCELLO, ALINE; BELOTI, LILIAN L.; ROMERO, FABIAN; et al. VapD in Xylella fastidiosa Is a Thermostable Protein with Ribonuclease Activity. PLoS One, v. 10, n. 12, DEC 22 2015. (01/07533-7, 12/51580-4, 11/50268-4)

SANTIAGO, ANDRE S.; SANTOS, CLELTON A.; MENDES, JULIANO S.; TOLEDO, MARCELO A. S.; BELOTI, LILIAN L.; SOUZA, ALESSANDRA A.; SOUZA, ANETE P.. Characterization of the LysR-type transcriptional regulator YcjZ-like from Xylella fastidiosa overexpressed in Escherichia coli. Protein Expression and Purification, v. 113, p. 72-78, SEP 2015. (01/07533-7, 12/51580-4, 11/50268-4)

MENDES, JULIANO S.; SANTIAGO, ANDRE S.; TOLEDO, MARCELO A. S.; HORTA, MARIA A. C.; DE SOUZA, ALESSANDRA A.; TASIC, LJUBICA; DE SOUZA, ANETE P.. In vitro Determination of Extracellular Proteins from Xylella fastidiosa. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 7, DEC 26 2016. (01/07533-7, 12/51580-4, 11/50268-4)

SANTIAGO, ANDRE DA SILVA; MENDES, JULIANO S.; DOS SANTOS, CLELTON A.; DE TOLEDO, MARCELO A. S.; BELOTI, LILIAN L.; CRUCELLO, ALINE; HORTA, MARIA A. C.; DE PINHO FAVARO, MARIANNA T.; MUNAR, DUBER M. M.; DE SOUZA, ALESSANDRA A.; et al. The Antitoxin Protein of a Toxin-Antitoxin System from Xylella fastidiosa Is Secreted via Outer Membrane Vesicles. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 7, DEC 20 2016. (11/50268-4)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SANTIAGO, André da Silva. Caracterização de duas proteínas pertencentes ao operon toxina-antitoxina e de um fator de transcrição do tipo LysR de Xylella fastidiosa. 2015. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia Campinas, SP.