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Análise de expressão e avaliação fenotípica de plantas de cana-de-açúcar transformadas geneticamente com o gene C4-PEPC

Processo: 12/12268-5
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de novembro de 2012
Vigência (Término): 30 de junho de 2013
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Helaine Carrer
Beneficiário:Flávio dos Santos
Instituição-sede: Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:08/52066-7 - Functional genomics of photosynthetic genes in sugarcane, AP.BIOEN.TEM
Assunto(s):Cana-de-açúcar   Fotossíntese   Cultura de tecidos

Resumo

Análisar fenotípica das plantas de cana-de-açúcar superexpressando o gene C4-PEPC, em condições normais e submetidas a estresse hídrico. Realizar extrações de RNA Total para a análise de expressão da C4-PEPC nas plantas transformadas. As plantas que apresentarem os maiores níveis de expressão em PCR quantitativo em Tempo Real serão selecionadas para os experimentos. Serão avaliados, em condição de rega diária e seca, os seguintes parâmetros:- fisiológicos: assimilação de CO2 (A); transpiração (E); condutância estomática (gS); concentração intercelular de CO2 (Ci); eficiência aparente de carboxilação (A/Ci); eficiência do uso da água (WUE = A/E); eficiência intrínseca do uso da água (WUEI = A/gS); e quantidade relativa de água nas folhas (RWC) (Barrs e Weatherley, 1962).- biométricos: crescimento da parte aérea e radicular, diâmetro do caule, número de folhas, número de perfilhos, peso fresco e peso seco.- bioquímicos: açúcares solúveis totais (Dubois et al., 1956), açúcares redutores (Nelson, 1944), proteínas totais solúveis (Bradford, 1976), teor de prolina (Bates et al., 1973).Os parâmetros fisiológicos serão medidos com o aparelho IRGA Infra Red Gas Analyzer. Serão realizadas analises de expressão em PCR quantitativo em termociclador Step One Plus (Applied Biosystems). Todos os dados serão submetidos a análise estatística, variância (ANOVA), as médias serão comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade.