Estudos estruturais das NEK quinases de Leishmania braziliensis.

• Processo: 11/24178-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2016
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Mário Tyago Murakami
• Beneficiário: Plínio Salmazo Vieira
• Instituição Sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Cristalografia Inibidores
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalografia | inibidores | NEK quinases | Relação Estrutura-Função | Cristalografia de Macromoléculas

Resumo

Proteínas quinases são mediadores chave de tradução de sinais, transmitindo interpretações do ambiente e coordenando processos intracelulares. De particular interesse entre as serina/treonina quinases de tripanosomatídeos está à família das Neks, envolvidas em diversas funções celulares. Seu grande número em tripanosomatídeos sugere que algumas podem ter funções únicas nesses organismos. Os tripanosomatídeos podem ser parasitas tanto de animais invertebrados ou vertebrados e algumas espécies são agentes etiológicos de doenças humanas que representam um problema de saúde pública em países tropicais, como Doença de Chagas, causada pelo Trypanosoma cruzi, e Leishmaniose, causada pelos parasitas do gênero Leishmania. Embora o papel das Nek quinases seja de amplo interesse, pouco é conhecido sobre o mecanismo básico em protistas. Como as proteínas quinases estão envolvidas diretamente na proliferação e/ou viabilidade dos estágios do ciclo de vida dos parasitas, cabe seu estudo como possíveis alvos de drogas. Entretanto, os fármacos atualmente em uso foram desenvolvidos há décadas, apresentam efeitos colaterais sérios e resistência por vários pacientes, indicando a necessidade urgente para o desenvolvimento de novas substâncias eficazes, baratas e seguras para o tratamento de leishmanioses e doença de Chagas. Assim, este projeto tem como objetivos caracterizar estruturalmente por métodos cristalográficos e biofísicos bem como selecionar potenciais inibidores para NEK quinases de L. braziliensis. Essas informações ao nível atômico são essenciais para um melhor entendimento das funções fisiológicas e mecanismos das NEK quinases nos parasitas e estritamente necessárias para estudos de busca e desenho de fármacos. Abordagens high-throughput como fluorometria diferencial de varredura (DSF) serão utilizadas na busca de potenciais ligantes e ferramentas analíticas como cinética enzimática e calorimetria de titulação isotérmica para caracterização das interações. Uma vez identificado ligantes promissores estes serão levados à triagem in vitro e in vivo para a avaliação do efeito dessas drogas no parasita.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

VIEIRA, PLINIO SALMAZO; DE GIUSEPPE, PRISCILA OLIVEIRA; CAVALCANTE DE OLIVEIRA, ARTHUR HENRIQUE; MURAKAMI, MARIO TYAGO. The role of the C-terminus and Kpn loop in the quaternary structure stability of nucleoside diphosphate kinase from Leishmania parasites. Journal of Structural Biology, v. 192, n. 3, p. 336-341, DEC 2015. (11/20569-2, 10/03761-4, 07/06755-2, 11/24178-8, 10/51730-0)

VIEIRA, PLINIO SALMAZO; CAMPOS BRASIL SOUZA, TATIANA DE ARRUDA; HONORATO, RODRIGO VARGAS; ZANPHORLIN, LETICIA MARIA; SEVERIANO, KELVEN ULISSES; ROCCO, SILVANA APARECIDA; CAVALCANTE DE OLIVEIRA, ARTHUR HENRIQUE; CORDEIRO, ARTUR TORRES; LOPES OLIVEIRA, PAULO SERGIO; DE GIUSEPPE, PRISCILA OLIVEIRA; et al. Pyrrole-indolinone SU11652 targets the nucleoside diphosphate kinase from Leishmania parasites. Biochemical and Biophysical Research Communications, v. 488, n. 3, p. 461-465, JUL 1 2017. (11/20569-2, 10/03761-4, 07/06755-2, 11/24178-8, 10/51730-0)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

VIEIRA, Plínio Salmazo. Estrutura, conformação e inibição de quinases de Leishmania. 2016. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia Campinas, SP.