| Processo: | 11/16018-0 |
| Linha de fomento: | Bolsas no Brasil - Mestrado |
| Vigência (Início): | 01 de janeiro de 2013 |
| Vigência (Término): | 28 de fevereiro de 2014 |
| Área do conhecimento: | Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Clínica e Cirurgia Animal |
| Pesquisador responsável: | Paulo César Ciarlini |
| Beneficiário: | Anelise Maria Bosco |
| Instituição-sede: | Faculdade de Medicina Veterinária (FMVA). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araçatuba. Araçatuba , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Insuficiência renal Patologia clínica Estresse oxidativo |
Resumo Em humanos a imunossupressão que ocorre em pacientes urêmicos está associada com a disfunção dos neutrófilos causada pelas toxinas urêmicas. O efeito da toxina urêmica p-cresol sobre a função dos neutrófilos humanos têm sido amplamente investigado. Esta toxina não é devidamente filtrada durante a hemodiálise e seu acumulo no sangue promove a inibição do metabolismo oxidativo dos neutrófilos, afetando dessa maneira a sua função bactericida. A disfunção neutrofílica em cães nefropatas ainda não foi adequadamente investigada. Recentemente nosso grupo obteve evidência in vitro de que o metabolismo oxidativo dos neutrófilos de cães sadios é afetado quando incubado como soro urêmico, porém até o momento não há estudos sobre o efeito específico do p-cresol sobre a função neutrofílica nesta espécie. Neste sentido, o presente trabalho objetiva mensurar as concentrações plasmáticas de p-cresol em cães hígidos e com IRC e testar a hipótese de que à semelhança ao que ocorre em humanos o aumento desta toxinaa está associado com alterações do metabolismo oxidativo e apoptose dos neutrófilos. Para tal será padronizada a metodologia para quantificar por cromatografia de fase líquida a concentração plasmática desta toxina em cães controles hígidos e portadores de IRC equivalente ao estágio IV. Também será avaliado e comparado in vitro o efeito específico do p-cresol sobre a produção de superóxido, a peroxidação lipídica e a taxa de apoptose de neutrófilos isolados de cães controles hígidos, considerando-se as concentrações plasmáticas observadas "in vivo" em cães com IRC. Células isoladas de 20 cães saudáveis serão incubadas em meio de RPMI, com e sem p-cresol, e plasma de cães com IRC. O metabolismo oxidativo dos neutrófilos será avaliado por citometria de fluxo capilar utilizando a sonda hidroetidina. A apoptose e a viabilidade dos neutrófilos será quantificada em citômetro de fluxo capilar utilizando sistema Anexina V-PE. O estresse oxidativo será avaliado pela quantificação plasmática das espécies reativas ao tiobarbitúrico, do status antioxidante total, ácido úrico, albumina e bilirrubina total. | |
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