Avaliação in vitro do p-cresol sobre o metabolismo oxidativo e apoptose dos neutrófilos de cães

• Processo: 11/16018-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2013
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Clínica e Cirurgia Animal
• Pesquisador responsável: Paulo César Ciarlini
• Beneficiário: Anelise Maria Bosco
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária (FMVA). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araçatuba. Araçatuba , SP, Brasil
• Assunto(s): Patologia clínica veterinária Insuficiência renal Respiração celular Estresse oxidativo Apoptose Neutrófilos Cães Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: canina | Estresse oxidativo | Insuficiência Renal | Polimorfonucleares | Toxina urêmica | Patologia Clínica

Resumo

Em humanos a imunossupressão que ocorre em pacientes urêmicos está associada com a disfunção dos neutrófilos causada pelas toxinas urêmicas. O efeito da toxina urêmica p-cresol sobre a função dos neutrófilos humanos têm sido amplamente investigado. Esta toxina não é devidamente filtrada durante a hemodiálise e seu acúmulo no sangue promove a inibição do metabolismo oxidativo dos neutrófilos, afetando dessa maneira a sua função bactericida. A disfunção neutrofílica em cães nefropatas ainda não foi adequadamente investigada. Recentemente nosso grupo obteve evidência in vitro de que o metabolismo oxidativo dos neutrófilos de cães sadios é afetado quando incubado como soro urêmico, porém até o momento não há estudos sobre o efeito específico do p-cresol sobre a função neutrofílica nesta espécie. Neste sentido, o presente trabalho objetiva mensurar as concentrações plasmáticas de p-cresol em cães hígidos e com IRC e testar a hipótese de que à semelhança ao que ocorre em humanos o aumento desta toxina está associado com alterações do metabolismo oxidativo e apoptose dos neutrófilos. Para tal será padronizada a metodologia para quantificar por cromatografia de fase líquida a concentração plasmática desta toxina em cães controles hígidos e portadores de IRC equivalente ao estágio IV. Também será avaliado e comparado in vitro o efeito específico do p-cresol sobre a produção de superóxido, a peroxidação lipídica e a taxa de apoptose de neutrófilos isolados de cães controles hígidos, considerando-se as concentrações plasmáticas observadas "in vivo" em cães com IRC. Células isoladas de 20 cães saudáveis serão incubadas em meio de RPMI, com e sem p-cresol, e plasma de cães com IRC. O metabolismo oxidativo dos neutrófilos será avaliado por citometria de fluxo capilar utilizando a sonda hidroetidina. A apoptose e a viabilidade dos neutrófilos será quantificada em citômetro de fluxo capilar utilizando sistema Anexina V-PE. O estresse oxidativo será avaliado pela quantificação plasmática das espécies reativas ao tiobarbitúrico, do status antioxidante total, ácido úrico, albumina e bilirrubina total. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BOSCO, A. M.; ALMEIDA, B. F. M.; PEREIRA, P. P.; DOS SANTOS, D. B.; NETO, A. J. S.; FERREIRA, W. L.; CIARLINI, P. C.. The uremic toxin methylguanidine increases the oxidative metabolism and accelerates the apoptosis of canine neutrophils. VETERINARY IMMUNOLOGY AND IMMUNOPATHOLOGY, v. 185, p. 14-19, MAR 2017. (11/16018-0, 11/18746-3)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

BOSCO, Anelise Maria. Avaliação in vitro do P-cresol sobre o metabolismo oxidativo e apoptose dos neutrófilos de cães. 2014. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Medicina Veterinária. Araçatuba Araçatuba.