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Avaliação in vitro do p-cresol sobre o metabolismo oxidativo e apoptose dos neutrófilos de cães

Processo: 11/16018-0
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de janeiro de 2013
Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2014
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Clínica e Cirurgia Animal
Pesquisador responsável:Paulo César Ciarlini
Beneficiário:Anelise Maria Bosco
Instituição-sede: Faculdade de Medicina Veterinária (FMVA). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araçatuba. Araçatuba , SP, Brasil
Assunto(s):Insuficiência renal   Patologia clínica   Estresse oxidativo

Resumo

Em humanos a imunossupressão que ocorre em pacientes urêmicos está associada com a disfunção dos neutrófilos causada pelas toxinas urêmicas. O efeito da toxina urêmica p-cresol sobre a função dos neutrófilos humanos têm sido amplamente investigado. Esta toxina não é devidamente filtrada durante a hemodiálise e seu acumulo no sangue promove a inibição do metabolismo oxidativo dos neutrófilos, afetando dessa maneira a sua função bactericida. A disfunção neutrofílica em cães nefropatas ainda não foi adequadamente investigada. Recentemente nosso grupo obteve evidência in vitro de que o metabolismo oxidativo dos neutrófilos de cães sadios é afetado quando incubado como soro urêmico, porém até o momento não há estudos sobre o efeito específico do p-cresol sobre a função neutrofílica nesta espécie. Neste sentido, o presente trabalho objetiva mensurar as concentrações plasmáticas de p-cresol em cães hígidos e com IRC e testar a hipótese de que à semelhança ao que ocorre em humanos o aumento desta toxinaa está associado com alterações do metabolismo oxidativo e apoptose dos neutrófilos. Para tal será padronizada a metodologia para quantificar por cromatografia de fase líquida a concentração plasmática desta toxina em cães controles hígidos e portadores de IRC equivalente ao estágio IV. Também será avaliado e comparado in vitro o efeito específico do p-cresol sobre a produção de superóxido, a peroxidação lipídica e a taxa de apoptose de neutrófilos isolados de cães controles hígidos, considerando-se as concentrações plasmáticas observadas "in vivo" em cães com IRC. Células isoladas de 20 cães saudáveis serão incubadas em meio de RPMI, com e sem p-cresol, e plasma de cães com IRC. O metabolismo oxidativo dos neutrófilos será avaliado por citometria de fluxo capilar utilizando a sonda hidroetidina. A apoptose e a viabilidade dos neutrófilos será quantificada em citômetro de fluxo capilar utilizando sistema Anexina V-PE. O estresse oxidativo será avaliado pela quantificação plasmática das espécies reativas ao tiobarbitúrico, do status antioxidante total, ácido úrico, albumina e bilirrubina total.

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
BOSCO, A. M.; ALMEIDA, B. F. M.; PEREIRA, P. P.; DOS SANTOS, D. B.; NETO, A. J. S.; FERREIRA, W. L.; CIARLINI, P. C. The uremic toxin methylguanidine increases the oxidative metabolism and accelerates the apoptosis of canine neutrophils. VETERINARY IMMUNOLOGY AND IMMUNOPATHOLOGY, v. 185, p. 14-19, MAR 2017. Citações Web of Science: 5.
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
BOSCO, Anelise Maria. Avaliação in vitro do P-cresol sobre o metabolismo oxidativo e apoptose dos neutrófilos de cães. 2014. 58 f. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Faculdade de Medicina Veterinária..

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