Seleção e identificação de mutações no operon pst associadas a constitutividade do regulon PHO

• Processo: 12/16580-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Beny Spira
• Beneficiário: Livia Akemi Moracima
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Genética molecular Mutação Fosfatos Regulação da expressão gênica Escherichia coli
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: coli | E | Fosfato | Mutações | Operon pst | regulon PHO | Regulação da expressão gênica

Resumo

O operon pst (ou pstSCAB-phoU) de E. coli pertence ao regulon PHO, que por sua vez responde ao estímulo externo de limitação de fosfato (Pi). Os genes de pst codificam para um sistema de transporte de Pi de alta afinidade, que também age como repressor do regulon PHO em condições de abundância de Pi no meio. Neste projeto serão isolados mutantes espontâneos de pst em meio de cultura contendo glicerol-2-fosfato (G2P) como fonte única de carbono. A presença de G2P no meio exerce uma pressão seletiva para aliviar a repressão que o excesso de Pi exerce sobre o regulon PHO, resultando em mutações em pst. Estas mutações são adaptativas, ou seja, surgem somente quando em contato com o substrato G2P. O mecanismo que origina mutações adaptativas não está claro. Com o intuito de caracterizar estes mutantes, algumas dezenas destas mutações serão identificadas e sequenciadas.