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Avaliação da infecção e imunidade de linhagens de aves (Gallus Gallus) suscetíveis e resistentes ao desafio por Salmonella enterica subesp. enterica sorovar Gallinarum

Processo: 12/24017-7
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de março de 2013
Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2017
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Patologia Animal
Pesquisador responsável:Angelo Berchieri Junior
Beneficiário:Rafael Antonio Casarin Penha Filho
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
Bolsa(s) vinculada(s):13/26122-5 - Identificação de antígenos protéicos homólogos em Salmonella enterica subesp. enterica sorovares Typhimurium, enteritidis, Heidelberg e Schwarzengrund, para a produção de proteína recombinante e avaliação como candidato vacinal em galinhas, BE.EP.PD
Assunto(s):Citocinas   Resposta imune   Linfócitos T   Galinhas

Resumo

Salmonella enterica subesp. enterica sorovar Gallinarum biovar Gallinarum (SG) pertence ao sorogrupo D de Salmonella enterica subesp. enterica e causa o tifo aviário em aves, uma doença caracterizada por alta mortalidade e morbidade em aves. O controle desta doença nas criações avícolas comerciais é realizado pela combinação de medidas de biossegurança, incluindo a vacinação de aves. Este biovar hospedeiro-específico é capaz de infectar galinhas em todas as idades. O quadro da enfermermidade varia ente as diferentes linhagens de aves comerciais. Aves de postura vermelhas de linhagem semi-pesada são altamente suscetíveis à infecção por SG e desenvolvem quadros severos e alta taxa de mortalidade em qualquer idade. Ao contrário, as aves de postura brancas de linhagem leve são resistentes à infecção e apresentam baixa mortalidade após a infecção.Este estudo foi formulado para avaliar a imunidade contra SG em dois diferentes experimentos. No primeiro estudo será avaliada a resposta imune inata após a infecção de aves de postura de ovos de linhagem leve (branca) e linhagem semi-pesada (vermelhas). Às 4h, 2 e 6 dias pós-infecção (dpi) aves das duas linhagens serão sacrificadas para a colheita de amostras para a avaliar a infecção bacteriana. Adicionalmente, a resposta imune celular será avaliada através da detecção de macrófagos e linfócitos T ³´ por imuno-histoquímica. A técnica de RT-PCR em tempo real será utilizada para quantificar a expressão de receptores envolvidos na detecção das bactéria e citocinas pró-inflamatórias.Em outro experimento, será avaliada a resposta imune adquirida de aves vacinadas com uma estirpe atenuada de SG, com deleção dos genes cobS e cbiA (SG”cobS”cbiA) com comprovado potencial vacinal contra SG selvagem (FAPESP Proc. N. 2007/53479-0). Este estudo terá o objetivo de identificar os elementos importantes envolvidos na proteção contra o desafio pela estirpe patogênica de SG. Para isso, a resposta será avaliada após a imunização com quinze e 1 dia antes da infecção (dai) e com 1, 3 e dez dias após a infecção (dpi) com SG. A técnica de RT-PCR em tempo real, será utilizada para quantificar a expressão de citocinas imunomodulatórias e o método de citometria de fluxo será utilizado para quantificar os linfócitos T efetores (CD4+CD44+ e CD8+CD44+). Os níveis de imunoglobulinas das classes IgM e IgG serão mensurados por ensaios imunoenzimáticos (ELISA Indireto). Ao final deste estudo se planeja gerar conhecimento sobre a as diferentes respostas imunes em aves vacinadas ou naturalmente resistentes ou suscetíveis à infecção por SG.

Publicações científicas (6)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
RUBIO, M. S.; PENHA, F. R. A. C.; ALMEIDA, A. M.; BARBOSA, F. O.; BERCHIERI JR, A. Duplex Real-Time PCR Using Sybr Green I for Quantification and Differential Diagnosis between Salmonella Enteritidis and Salmonella Typhimurium. Brazilian Journal of Poultry Science, v. 21, n. 1 JAN-MAR 2019. Citações Web of Science: 0.
FERREIRA, JOSEANE CRISTINA; CASARIN PENHA FILHO, RAFAEL ANTONIO; ANDRADE, LEONARDO NEVES; BERCHIERI JUNIOR, ANGELO; COSTA DARINI, ANA LUCIA. Diversity of plasmids harboring bla(CMY-2) in multidrug-resistant Escherichia coli isolated from poultry in Brazil. DIAGNOSTIC MICROBIOLOGY AND INFECTIOUS DISEASE, v. 88, n. 4, p. 361-364, AUG 2017. Citações Web of Science: 5.
RUBIO, MARCELA DA SILVA; CASARIN PENHA FILHO, RAFAEL ANTONIO; DE ALMEIDA, ADRIANA MARIA; BERCHIERI JUNIOR, ANGELO. Development of a multiplex qPCR in real time for quantification and differential diagnosis of Salmonella Gallinarum and Salmonella Pullorum. AVIAN PATHOLOGY, v. 46, n. 6, p. 644-651, 2017. Citações Web of Science: 2.
CASARIN PENHA FILHO, RAFAEL ANTONIO; ACELAS DIAZ, SILVIA JULIANA; MEDINA, TIAGO DA SILVA; CHANG, YUNG-FU; DA SILVA, JOAO SANTANA; BERCHIERI, JR., ANGELO. Evaluation of protective immune response against fowl typhoid in chickens vaccinated with the attenuated strain Salmonella Gallinarum Delta cobS Delta cbiA. Research in Veterinary Science, v. 107, p. 220-227, AUG 2016. Citações Web of Science: 2.
FERREIRA, JOSEANE CRISTINA; CASARIN PENHA FILHO, RAFAEL ANTONIO; ANDRADE, LEONARDO NEVES; BERCHIERI JUNIOR, ANGELO; COSTA DARINI, ANA LUCIA. Evaluation and characterization of plasmids carrying CTX-M genes in a non-clonal population of multidrug-resistant Enterobacteriaceae isolated from poultry in Brazil. DIAGNOSTIC MICROBIOLOGY AND INFECTIOUS DISEASE, v. 85, n. 4, p. 444-448, AUG 2016. Citações Web of Science: 13.
CASARIN PENHA FILHO, RAFAEL ANTONIO; ACELAS DIAZ, SILVIA JULIANA; FERNANDO, FILIPE SANTOS; CHANG, YUNG-FU; ANDREATTI FILHO, RAPHAEL LUCIO; BERCHIERI JUNIOR, ANGELO. Immunomodulatory activity and control of Salmonella Enteritidis colonization in the intestinal tract of chickens by Lactobacillus based probiotic. VETERINARY IMMUNOLOGY AND IMMUNOPATHOLOGY, v. 167, n. 1-2, p. 64-69, SEP 15 2015. Citações Web of Science: 17.

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