Novas estratégias para obtenção de anticorpos recombinantes contra as toxinas Stx1 e Stx2 de Escherichia coli produtora da toxina de Shiga

• Processo: 13/03160-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Roxane Maria Fontes Piazza
• Beneficiário: Daniela Luz Hessel da Cunha
• Supervisor: Sachdev S. Sidhu
• Instituição Sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Toronto (U of T), Canadá
• Vinculado à bolsa: 10/20148-4 - Anticorpos recombinantes (scFv) contra a proteína EspB e as toxinas Stx1 e Stx2: obtenção e caracterização dessas ferramentas para o Imunodiagnóstico de Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) e Escherichia coli produtora da Toxina de Shiga (STEC), BP.DR
• Assunto(s): Anticorpos Escherichia coli Shiga toxigênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Anticorpos | diagnóstico | ScFv | Stec | Anticorpos recombinantes

Resumo

Escherichia coli produtora da toxina de Shiga é responsável por causar colite hemorrágica e síndrome hemolítica urêmica, agravando o caso dos pacientes acometidos por esta bactéria. O diagnóstico hoje dessas linhagens não é comum na rotina laboratorial dos países em desenvolvimento. A ampliação de ferramentas ótimas para a detecção destas toxinas se torna de grande relevância para o seu diagnóstico. Os anticorpos tem se mostrado moléculas excelentes como reagentes ligantes de proteínas de alta afinidade. Na rotina laboratorial, os anticorpos IgG podem ser obtidos de duas maneiras; os anticorpos policlonais (pAbs), apresentam diferentes afinidades e especificidades, sendo produzidos em quantidades limitadas. Em contraste, os monoclonais (mAbs) apresentam homogeneidade, alta especificidade e são produzidos ilimitadamente, através da cultura de células especializadas. Com o intuito de manter a homogeneidade e a especificidade dos anticorpos monoclonais, aliados ainda à produção em larga escala com baixo custo, a engenharia genética tem sido utilizada para obtenção de anticorpos recombinantes como os scFv e os Fab que são fragmentos de anticorpos que possuem as regiões de reconhecimento ao antígeno. O objetivo deste projeto baseia-se na aplicação de diferentes estratégias para a obtenção de fragmentos variáveis de cadeia única contra as toxinas Stx1 e Stx2 para serem utilizados como ferramenta no imunodiagnóstico de E. coli produtora da toxina de Shiga. (AU)

Publicações científicas

(5)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

LUZ, DANIELA; CHEN, GANG; MARANHAO, ANDREA Q.; ROCHA, LETICIA B.; SIDHU, SACHDEV; PIAZZA, ROXANE M. F.. Development and Characterization of Recombinant Antibody Fragments That Recognize and Neutralize In Vitro Stx2 Toxin from Shiga Toxin-Producing Escherichia coli. PLoS One, v. 10, n. 3, MAR 19 2015. (11/12928-2, 13/03160-9, 10/20148-4)

HENRIQUE, IZABELLA DE MACEDO; SACERDOTI, FLAVIA; FERREIRA, RAISSA LOZZARDO; HENRIQUE, CAMILA; AMARAL, MARIA MARTA; PIAZZA, ROXANE MARIA FONTES; LUZ, DANIELA. herapeutic Antibodies Against Shiga Toxins: Trends and Perspective. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 12, FEB 10 2022. (18/24659-5, 19/24276-1, 17/17213-8, 15/17178-2, 13/03160-9, 18/13895-0)

LUZ, DANIELA; GOMEZ, FERNANDO D.; FERREIRA, RAISSA L.; MELO, BRUNA S.; GUTH, BEATRIZ E. C.; QUINTILIO, WAGNER; MORO, ANA MARIA; PRESTA, AGOSTINA; SACERDOTI, FLAVIA; IBARRA, CRISTINA; et al. The Deleterious Effects of Shiga Toxin Type 2 Are Neutralized In Vitro by FabF8:Stx2 Recombinant Monoclonal Antibody. TOXINS, v. 13, n. 11, NOV 2021. (13/03160-9, 19/24276-1, 18/24659-5, 18/13895-0, 15/17178-2)

LUZ, DANIELA; SHIGA, EMERSON A.; CHEN, GANG; QUINTILIO, WAGNER; ANDRADE, FERNANDA B.; MARANHAO, ANDREA Q.; CAETANO, BRUNA A.; MITSUNARI, THAIS; SILVA, MIRIAM A.; ROCHA, LETICIA B.; et al. Structural Changes in Stx1 Engineering Monoclonal Antibody Improves Its Functionality as Diagnostic Tool for a Rapid Latex Agglutination Test. ANTIBODIES, v. 7, n. 1, MAR 2018. (11/12928-2, 17/17006-2, 13/03160-9)

SHIGA, E. A.; GUTH, B. E. C.; PIAZZA, R. M. F.; LUZ, D.. Comparative analysis of rapid agglutination latex test using single-chain antibody fragments (scFv) versus the gold standard Vero cell assay for Shiga toxin (Stx) detection. Journal of Microbiological Methods, v. 175, AUG 2020. (15/17178-2, 17/17006-2, 13/03160-9)