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Implicação funcional da hNek7 e suas proteínas de interação RGS2, beta-tubulina, NEK9 e MNAT1 em mitose e citocinese

Processo: 13/04386-0
Linha de fomento:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
Vigência (Início): 01 de julho de 2013
Vigência (Término): 31 de outubro de 2013
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Jörg Kobarg
Beneficiário:Edmarcia Elisa de Souza
Supervisor no Exterior: Stephen J. Doxsey
Instituição-sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovações (Brasil). Campinas , SP, Brasil
Local de pesquisa: University of Massachusetts Medical School (UMMS), Estados Unidos  
Vinculado à bolsa:09/11912-5 - Expressão da proteína cinase humana Nek7 para estudos estruturais e funcionais, BP.DR
Assunto(s):Ciclo celular   Neoplasias

Resumo

NIMA-related kinases (Neks) estão entre maiores reguladores mitóticos e sua desregulação tem sido fortemente correlacionada com a proliferação celular descontrolada e o aparecimento de tumores. A Nek7 humana é um regulador da divisão celular e desempenha importantes papéis no crescimento e sobrevivência de células de mamíferos. Através de duplo híbrido em levedura, nós identificamos 25 parceiros de interação com a Nek7 humana que pertencem a diferentes processos biológicos dentre eles mitose e citocinese onde se incluem as proteínas: MNAT1, ²-tubulina, RGS2 e Nek9. Observou-se por fosforilação in vitro que ²-tubulina, RGS2 e Nek9 são substratos de Nek7 atribuindo o papel da atividade de Nek7 na manutenção da integridade do ciclo celular. Além disso, ensaios de knockdown para Nek7 utilizando shRNA mostraram a necessidade de Nek7 para a acumulação de ²-tubulina e Nek9 na interfase. Usando microscopia confocal, nós obervamos que Nek7 colocaliza com pericentrina no polo do fuso na prometafase, com ²-tubulina na midzone do fuso na anáfase e na ponte citoplasmática na citocinese. ²-tubulina colocaliza com Nek9 no polo do fuso na anáfase e na ponte citoplasmática na citocinese e Nek9 colocaliza com pericentrina na prófase, prometafase, anáfase e telófase, destacando a participação de Nek7 e suas proteínas de interação em importantes processos celulares através dos diferentes estágios do ciclo celular. Entretanto, dada às funções de MNAT1, ²-tubulina, RGS2 e Nek9 no ciclo celular, a questão de como a Nek7 pode regular e integrar a via de sinalização destas proteínas através dos diferentes estágios do ciclo celular permanece sem resposta. Isto leva-nos a identificar e caracterizar os mecanismos moleculares, celulares e funcionais destas proteínas através do ciclo celular, especialmente em mitose e citocinese. (AU)

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