Implicação funcional da hNek7 e suas proteínas de interação RGS2, beta-tubulina, NEK9 e MNAT1 em mitose e citocinese

• Processo: 13/04386-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de julho de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2013
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Jörg Kobarg
• Beneficiário: Edmarcia Elisa de Souza
• Supervisor: Stephen J. Doxsey
• Instituição Sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: University of Massachusetts Medical School (UMMS), Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 09/11912-5 - Expressão da proteína cinase humana Nek7 para estudos estruturais e funcionais, BP.DR
• Assunto(s): Ciclo celular Transdução de sinais Quinases relacionadas a NIMA Neoplasias Oncoproteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer | ciclo celular | cinase | onco-proteína | proteína reguladora | proteína sinalizadora | Sinalização

Resumo

NIMA-related kinases (Neks) estão entre maiores reguladores mitóticos e sua desregulação tem sido fortemente correlacionada com a proliferação celular descontrolada e o aparecimento de tumores. A Nek7 humana é um regulador da divisão celular e desempenha importantes papéis no crescimento e sobrevivência de células de mamíferos. Através de duplo híbrido em levedura, nós identificamos 25 parceiros de interação com a Nek7 humana que pertencem a diferentes processos biológicos dentre eles mitose e citocinese onde se incluem as proteínas: MNAT1, ²-tubulina, RGS2 e Nek9. Observou-se por fosforilação in vitro que ²-tubulina, RGS2 e Nek9 são substratos de Nek7 atribuindo o papel da atividade de Nek7 na manutenção da integridade do ciclo celular. Além disso, ensaios de knockdown para Nek7 utilizando shRNA mostraram a necessidade de Nek7 para a acumulação de ²-tubulina e Nek9 na interfase. Usando microscopia confocal, nós obervamos que Nek7 colocaliza com pericentrina no polo do fuso na prometafase, com ²-tubulina na midzone do fuso na anáfase e na ponte citoplasmática na citocinese. ²-tubulina colocaliza com Nek9 no polo do fuso na anáfase e na ponte citoplasmática na citocinese e Nek9 colocaliza com pericentrina na prófase, prometafase, anáfase e telófase, destacando a participação de Nek7 e suas proteínas de interação em importantes processos celulares através dos diferentes estágios do ciclo celular. Entretanto, dada às funções de MNAT1, ²-tubulina, RGS2 e Nek9 no ciclo celular, a questão de como a Nek7 pode regular e integrar a via de sinalização destas proteínas através dos diferentes estágios do ciclo celular permanece sem resposta. Isto leva-nos a identificar e caracterizar os mecanismos moleculares, celulares e funcionais destas proteínas através do ciclo celular, especialmente em mitose e citocinese. (AU)