Pesquisa de mutações no gene da 5alfa redutase 2 (SRD5A2) em pacientes portadores de distúrbios do desenvolvimento sexual 46,XY de causa indeterminada

• Processo: 12/18708-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2013
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2014
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Sorahia Domenice
• Beneficiário: Giselle Aparecida Neres de Souza
• Instituição Sede: Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP (HCFMUSP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Endocrinologia Transtornos 46, XX do desenvolvimento sexual Mutação Reação em cadeia por polimerase (PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Deficiência da enzima 5alfa redutase | Distúrbios do desenvolvimento Sexual | genitalia ambigua | Mutações | Endocrinologia

Resumo

Nos mamíferos, para que ocorra o desenvolvimento sexual normal, uma cascata de eventos moleculares, celulares e hormonais deve ocorrer de forma sincronizada no tempo e espaço (órgãos). Em humanos, uma falha em qualquer destas etapas pode prejudicar o desenvolvimento gonadal e/ou sexual normal e causar anomalias classificadas como Distúrbios do Desenvolvimento Dexual (DDS). Indivíduos portadores de DDS apresentam um largo espectro fenotípico que pode variar de ambiguidade genital, distúrbios do desenvolvimento puberal à infertilidade. Anormalidades nos genes envolvidos na cascata da diferenciação sexual masculina, nos receptores hormonais celulares, na produção e ação dos andrógenos, testosterona e dihidrotestosterona, são causas dos DDS 46,XY. Porém, em um número significativo de pacientes a etiologia desta anormalidade pode não ser esclarecida, sendo estes casos classificados como DDS 46,XY indeterminados. A testosterona secretada pelo testículo fetal é convertida perifericamente pela ação da enzima 5alfa redutase tipo 2 (5±RD2) em dihidrotestosterona (DHT), que age nos tecidos precursores da genitália externa. A síntese da enzima 5±RD2 na pele genital é extremamente importante para a diferenciação normal da genitália externa masculina fetal. Nos pacientes portadores de DDS 46,XY por deficiência da enzima 5±RD2, a conversão da testosterona em seu metabólito ativo DHT não ocorre de forma adequada, o que determina uma virilização insuficiente da genitália externa durante o período embrionário. Os indivíduos afetados apresentam um amplo espectro fenotípico que pode variar desde genitália externa ambígua, com microfallus associado a diferentes graus de hipospádia até uma genitália externa feminina com clitoromegalia isolada. O objetivo deste estudo é pesquisar a presença de mutações no gene SRD5A2 em um grupo de 36 pacientes com DDS 46,XY de causa indeterminada. A metodologia proposta neste estudo utilizará a técnica de amplificação do DNA genômico pela reação de polimerização em cadeia (PCR) usando oligonucleotídeos específicos para o gene SRD5A2 seguida pelo sequenciamento automático desses produtos. A técnica de multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) será utilizada na pesquisa da presença de deleções no gene SRD5A2. (AU)