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Método para a determinação da distribuição de clones em co-cultura através de PCR em tempo real

Processo: 13/04961-5
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Programa Capacitação - Treinamento Técnico
Vigência (Início): 01 de maio de 2013
Vigência (Término): 30 de abril de 2014
Área do conhecimento:Engenharias - Engenharia Química
Pesquisador responsável:Sindelia Freitas Azzoni
Beneficiário:Karla Yukari Katayama
Instituição-sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia, Inovações e Comunicações (Brasil). Campinas , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:10/08089-2 - Desenvolvimento de uma plataforma de expressão, baseada em E. coli, para a produção de enzimas envolvidas na hidrólise de biomassas lignocelulósicas, AP.JP
Assunto(s):Reação em cadeia por polimerase (PCR)   Tempo-real   Clonagem

Resumo

Estabelecer e validar protocolo para a determinação da distribuição de clones para a expressão de diferentes enzimas recombinantes sendo produzidas em co-cultura através de PCR em tempo real. O emprego da técnica de PCR em tempo real para o acompanhamento da expressão de proteínas através da quantificação de mRNA é conhecido (Carapuça et al. 2007) e pretende-se neste trabalho fazer uso do mesmo conceito empregando-o na detecção e, se possível, a determinação da distribuição dos clones ao longo do tempo de cultivo. A distribuição dos clones dentro da cultura é um importante parâmetro de avaliação da técnica de co-cultura aplicada à produção de coquetéis sintéticos. A técnica de PCR em tempo real e o desenvolvimento de reações de PCR exigem um nível de qualificação do bolsista de pelo graduação, no mínimo. Neste trabalho será possível capacitar o bolsista em uma técnica muito importante para a busca de respostas em níveis da expressão de gênica, que pode ser muito bem aplicada em outras áreas de trabalho (saúde humana, veterinária, biomédica, etc.). (AU)