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Isolamento de tecidos embrionários para a análise de ChIP-seq e caracterização da expressão gênica por imuno-histoquímica

Processo: 13/07164-9
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de maio de 2013
Vigência (Término): 30 de abril de 2014
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Embriologia
Pesquisador responsável:Henrique Marques Barbosa de Souza
Beneficiário:Cyro von Zuben de Valega Negrão
Instituição-sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:12/09602-0 - Caracterização da rede de regulação cardiogênica controlada por Coup-TFII a partir de células-tronco embrionárias, AP.JP
Assunto(s):Imuno-histoquímica   Embriogênese   Expressão gênica

Resumo

A presente proposta de projeto de pesquisa visa a caracterização da rede de regulação gênica controlada pelo fator de transcrição Coup-TFII durante o desenvolvimento cardíaco. Visando uma maior flexibilidade técnica, está sendo aqui proposto a análise desta rede de regulação gênica em cardiomiócitos derivados de células-tronco embrionárias. Entretanto, apreciamos a necessidade de se traçar um paralelo entre os resultados obtidos para os cardiomiócitos derivados a partir de CTE e o desenvolvimento embrionário. Para isso, a análise de ChIP-seq para Coup-TFII será também realizada em tecido cardíaco de embriões de camundongos em diferentes estágios do desenvolvimento. Além disso, a proposta envolve a análise de expressão gênica, pela técnica de PCR quantitativo (qPCR), que será realizada através do isolamento de diferentes tecidos embrionários. Como uma forma de acrescer maiores detalhes ao conjunto de informações envolvendo o papel crucial de Coup-TFII durante o desenvolvimento, o padrão de expressão de Coup-TFII será caracterizado por imuno-histoquímica durante diferentes estágios do desenvolvimento embrionário.