Avaliação do efeito protetor do pré e pós-condicionamento em modelo de isquemia renal transitória: estudo experimental em ratos submetidos à anestesia geral balanceada

• Processo: 13/09874-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de julho de 2013
• Vigência (Término): 31 de dezembro de 2015
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Cirurgia
• Pesquisador responsável: Norma Sueli Pinheiro Módolo
• Beneficiário: Renata Torres Bueno
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Precondicionamento isquêmico Anestesia geral Testes de função renal Ratos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: anestesia geral | Condicionamento | Função Renal | Modelo de isquemia renal | Ratos | Anestesiologia

Resumo

O pré-condicionamento é descrito como um mecanismo protetor, inicialmente aplicado para estudar a prevenção de danos da isquemia miocárdica após pequenos episódios de oclusão das coronárias (pré-condicionamento isquêmico) ou pela administração de certos fármacos (pré-condicionamento farmacológico). É considerado método para adaptar o tecido a episódio isquêmico, previamente a um estímulo mais duradouro, com o objetivo de reduzir a extensão da injúria. A tolerância à isquemia é induzida pela regulação da função endotelial, do fluxo sanguíneo e diminuição da atividade de macrófagos e neutrófilos. A lesão renal aguda (LRA) é caracterizada por rápida redução da função renal que potencialmente pode ser reversível, tem incidência variável dependendo dos critérios utilizados para sua definição. Evidências clínicas têm demonstrado que mesmo pequenos aumentos nos níveis séricos de creatinina acima da faixa de normalidade estão relacionados com aumento da morbidade e da mortalidade, bem como interferem com a progressão para doença renal crônica. Em consenso publicado por Bellomo et al., 2004, foi criado o critério RIFLE, o qual definiu a LRA baseando-se na creatinina plasmática e no débito urinário. Este consenso classificou a LRA em 3 categorias de gravidade (risco, lesão e falência) e em 2 categorias clínicas (perda renal e estágio final). Em 2007, o critério de RIFLE foi modificado por um novo painel um pouco mais elaborado e de aplicação prática mais simples: o critério de AKIN (Acute Kidney Injury Network). Este define LRA como uma redução abrupta da função renal com aumento absoluto de 0,3 mg\dL ou aumento de 50% no valor basal da creatinina, ou oligúria. Tanto o critério AKIN quanto o critério RIFLE baseiam-se na creatinina sérica como um biomarcador da função renal. Entretanto, a alteração no valor da creatinina sérica não consegue diferenciar as causas de LRA como hipovolemia, alteração na perfusão renal, obstrução das vias urinárias ou lesão parenquimatosa. Há também fortes evidências que a alteração na creatinina sérica pode não ocorrer até horas ou dias depois do início da lesão renal, além de ser um marcador pouco específico visto que sofre grandes influências das variações de massa muscular e secreção tubular, e de fatores não renais como peso, raça, sexo, fármacos utilizados e ingestão proteica. A pesquisa tem como objetivo principal avaliar o efeito protetor do pré e pós-condicionamento isquêmico, isoladamente ou em conjunto após lesão renal aguda em ratos submetidos à isquemia renal sob anestesia geral balanceada; secundários: correlacionar marcadores renais precoces como a NGAL, KIM-1 e IL-18 com o critério de AKIN, relacionar lesão histológica renal com a dosagem dos biomarcadores e o critério de AKIN. Serão incluídos no estudo 40 ratos Winstar, machos, com pesos equivalentes, fornecidos pelo Biotério Central do Campus de Botucatu, distribuídos aleatoriamente em 5 grupos de 8 animais: G0, G1, G2, G3 e G4. Todos serão induzidos por via inalatória com isoflurano, em concentração inspirada de 3 a 4% e fluxo de 4 litros por minuto durante 5 min e mantidos com anestesia geral balanceada. Serão hidratados com Ringer lactato em bomba de infusão contínua, após cada coleta de amostra sanguínea de 1,5mL será realizada reposição com 3mL de Ringer lactato. Em todos os grupos serão realizados laparotomia mediana e nefrectomia à direita, após 30 minutos de liberação do último clampeamento os fármacos serão suspensos 12 horas após, reabertura da laparotomia e nefrectomia esquerda. Os dados serão avaliados em 4 momentos: no M0, os sinais vitais; no M1, os sinais vitais, a creatinina sérica e a NGAL sérica; no M2, serão novamente avaliados os sinais vitais e a NGAL sérica e no M3, a creatinina e a NGAL séricas, a NGAL urinária, a KIM-1, a IL18 e a análise histológica.Unitermos: Pré-condicionamento - Pós-condicionamento - Isquemia renal - Ratos (AU)