Contribuição da elevação da esteroidogênese e/ou da deficiência da NADP-transidrogenase no estresse oxidativo mitocondrial das células de camundongos hipercolesterolêmicos

• Processo: 13/05497-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Vigência (Início): 01 de agosto de 2013
• Vigência (Término): 31 de maio de 2017
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia Geral
• Pesquisador responsável: Helena Coutinho Franco de Oliveira
• Beneficiário: Alessandro Gonzalez Salerno
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 16/01044-0 - Efeitos do transplante de células-tronco mesenquimais no estresse oxidativo em camundongos GSNOR-/- e seus controles C57BL6/J., BE.EP.PD
• Assunto(s): Hipercolesterolemia Esteroidogênese
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: esteroidogênese | Estresse Oxidativo Mitocondrial | hipercolesterolemia | modelos geneticamente modificados | NADP-transidrogenase | Metabolismo de lípides

Resumo

Em trabalhos publicados por nosso grupo, demonstramos que há uma importante contribuição das mitocôndrias no estabelecimento de um estresse oxidativo em tecidos de camundongos geneticamente hipercolesterolêmicos, o que pode ser relevante para a aterogênese destes animais. As mitocôndrias destes animais apresentaram uma diminuição de seu conteúdo de NADPH, principal poder redutor para reconstituição do sistema enzimático glutationa redutase/peroxidase. Também demonstramos que havia aumento da lipogênese e esteroidogênese hepática, o que nos levou a propor que estes processos biossintéticos eram responsáveis pelo consumo de grandes quantidades de NADPH. A inibição farmacológica da esteroidogênese não pôde ser usada como contraprova de nossa proposta devido a efeitos tóxicos de estatinas diretamente nas mitocôndrias. Desta maneira, nossa hipótese de que o estresse oxidativo mitocondrial estará reduzido em paralelo com a redução da síntese de colesterol necessita de uma abordagem molecular (antisense oligonucleotides e/ou RNAs de interferência para o knockdown in vivo e in vitro da HMGCoA). Como estes animais também apresentam deficiência genética da NADP-transidrogenase mitocondrial ou transidrogenase de nucleotídeos de nicotinamida (NNT) em seu background (C57BL6/J), uma enzima essencial para manutenção do teor de NADPH na mitocôndria, ela também será objeto de nossa investigação. Para tanto usaremos o knockdown da NNT em camundongos selvagens e a transfecção da NNT em células dos camundongos hipercolesterolêmicos. Assim, neste projeto pretendemos determinar a origem do estresse oxidativo mitocondrial observado em tecidos e células dos camundongos hipercolesterolêmicos. Nossa hipótese é que a depleção do NADPH demonstrado nestas mitocôndrias seja conseqüência de duas possibilidades, mutuamente não excludentes: aumento de esteroidogênese e deficiência da NNT. Portanto, usando ferramentas moleculares em estudos in vivo e in vitro, em células geneticamente manipuladas, pretendemos quantificar a contribuição relativa de cada um destes processos.

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SALERNO, ALESSANDRO G.; RENTZ, THIAGO; DORIGHELLO, GABRIEL G.; MARQUES, ANA CAROLINA; LORZA-GIL, ESTELA; WANSCHEL, AMARYLIS C. B. A.; DE MORAES, AUDREY; VERCESI, ANIBAL E.; OLIVEIRA, HELENA C. F.. Lack of mitochondrial NADP(H)-transhydrogenase expression in macrophages exacerbates atherosclerosis in hypercholesterolemic mice. Biochemical Journal, v. 476, p. 21-pg., 2019-12-01. (11/15103-4, 11/15101-1, 13/05497-0, 11/50400-0, 17/02903-9, 13/07607-8, 17/17728-8)

SALERNO, ALESSANDRO G.; RENTZ, THIAGO; DORIGHELLO, GABRIEL G.; MARQUES, ANA CAROLINA; LORZA-GIL, ESTELA; WANSCHEL, AMARYLIS C. B. A.; DE MORAES, AUDREY; VERCESI, ANIBAL E.; OLIVEIRA, HELENA C. F.. Lack of mitochondrial NADP(H)-transhydrogenase expression in macrophages exacerbates atherosclerosis in hypercholesterolemic mice. Biochemical Journal, v. 476, n. 24, p. 3769-3789, DEC 2019. (11/15101-1, 11/15103-4, 11/50400-0, 13/05497-0, 17/17728-8, 13/07607-8, 17/02903-9)

WANSCHEL, AMARYLIS C. B. A.; GUIZONI, DANIELE M.; LORZA-GIL, ESTELA; SALERNO, ALESSANDRO G.; PAIVA, ADRIENE A.; DORIGHELLO, GABRIEL G.; DAVEL, ANA PAULA; BALKAN, WAYNE; HARE, JOSHUA M.; OLIVEIRA, HELENA C. F.. The Presence of Cholesteryl Ester Transfer Protein (CETP) in Endothelial Cells Generates Vascular Oxidative Stress and Endothelial Dysfunction. BIOMOLECULES, v. 11, n. 1, JAN 2021. (16/01746-4, 13/05497-0, 11/50400-0, 13/07607-8, 13/09347-3, 16/01044-0)