| Processo: | 13/10473-3 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado |
| Data de Início da vigência: | 01 de setembro de 2013 |
| Data de Término da vigência: | 31 de agosto de 2015 |
| Área de conhecimento: | Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal |
| Pesquisador responsável: | Flávio Vieira Meirelles |
| Beneficiário: | Juliano Coelho da Silveira |
| Instituição Sede: | Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil |
| Vinculado ao auxílio: | 12/50533-2 - GIFT: melhoramento genômico de características relacionadas com a fertilização em gado bovino dinamarquês e brasileiro, AP.TEM |
| Assunto(s): | MicroRNAs Comunicação celular |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | células da granulosa e do cúmulus | Comptetência de oócito e desenvolvimento embrionário | Desenvolvimento de folículo ovariano | Exossomos e microvesículas | miRNAs | vesículas secretadas por células | Comunicação celular |
Resumo O uso de técnicas de reprodução assistida é uma alternativa para solucionar problemas reprodutivos assim como aumentar a velocidade de seleção em espécies de valor agronômico. Todavia, existe a preocupação de que o cultivo in vitro assim como a injeção intracitoplasmática de esperma possam gerar mudanças epigenéticas as quais podem levar à maior pré-disposição a problemas reprodutivos na vida adulta. Mudanças epigenéticas normalmente são reguladas por metilação assim como por microRNAs. MicroRNAs são RNAs não codificadores de proteínas que regulam a expressão gênica durante diferentes processos de diferenciação de tecidos. Recentemente, vesículas secretadas por células chamadas de exossomos e microvesículas foram encontradas em diferentes fluidos corporais (incluindo o líquido folicular) contendo material bioativo incluindo proteínas e miRNAs. Vesículas secretadas por células são consideradas uma nova classe de comunicação celular com implicações em diferentes processos fisiológicos. Portanto, a hipótese que será testada é que vesículas secretadas por células foliculares contendo proteínas e miRNAs são capazes de modular mudanças epigenéticas durante o desenvolvimento in vitro de oócitos e embriões. Para testar esta hipótese, folículos ovarianos (3-4 mm) serão isolados e os oócitos maturados in vitro. Baseado nos resultados, os oócitos serão designados a três diferentes grupos de acordo com a competência de maturação e fertilização (grupos). De maneira retrospectiva, vesículas serão isoladas a partir de líquido folicular e utilizadas para os experimentos de acordo com o grupo de origem. O primeiro objetivo é determinar conteúdo proteico e de RNA (mRNA, miRNA, lncRNA e snoRNA) de microvesículas e exossomos isolados no líquido folicular em relação a competência dos oócitos. O segundo objetivo é determinar a origem celular de vesículas isoladas em líquido folicular com base em marcadores proteicos e de RNA. O terceiro objetivo é avaliar a função de exossomos e microvesículas durante a maturação in vitro de oócitos e o desenvolvimento embrionário inicial, avaliando assim as mudanças epigenéticas. Os resultados deste projeto ajudarão a estabelecer o papel de vesículas secretadas por células do folículo ovariano em relação a mudanças epigenéticas adquiridas durante o cultivo in vitro de oócitos e embriões, permitindo o desenvolvimento de novas ferramentas terapêuticas para espécies domésticas e humanos. | |
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