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Mutagênese sítio dirigida de uma nova autotransportadora em uma linhagem de Escherichia coli patogênica para aves (APEC) e avaliação da contribuição deste gene à patogenicidade

Processo: 13/09167-5
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2013
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2016
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
Pesquisador responsável:Wanderley Dias da Silveira
Beneficiário:Thaís Cabrera Galvão Rojas
Instituição-sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
Assunto(s):Escherichia coli   Mutação

Resumo

Atualmente, o Brasil é o maior exportador de carne de frango e o terceiro maior produtor mundial, sendo, por isso, a indústria avícola importante para as economias interna e exportadora. Apesar de ser um importante segmento econômico, a indústria avícola está sujeita a fatores que podem afetar significativamente seus rendimentos e custos. Dentre eles, as infecções causadas por Escherichia coli patogênica para aves (APEC) são responsáveis por altas taxas de morbidade e mortalidade. Linhagens patogênicas para aves estão associadas a infecções extra-intestinais, sendo o termo colibacilose empregado para englobar o grande número de doenças existentes. Além disso, estudos já demonstram que linhagens APEC e linhagens de E. coli patogênicas extra-intestinais de origem humana (ExPEC) compartilham características de patogenicidade, como sorogrupos, grupos filogenéticos e genótipos de virulência incluindo sequências relacionadas a plasmídeos, à adesão bacteriana, sistemas de captação de ferro e toxinas. Inúmeros trabalhos já foram realizados procurando estabelecer os mecanismos de patogenicidade, a identificação de marcadores e a descrição de novas proteínas de virulência em linhagens APEC. No entanto, mais estudos são necessários para compreender e identificar os mecanismos de patogenicidade e os fatores de virulência relacionados a esse patótipo. Atualmente, a disponibilidade de sequências genômicas possibilita a análise comparativa entre diferentes linhagens, permitindo acessar a variabilidade relacionada ao conteúdo gênico, à organização genômica e o estudo comparativo dos genomas. A comparação dos genomas das linhagens brasileiras sequenciadas (SEPT362, SCI-07, O08 e S17) já permitiu observar a grande variabilidade que existe quanto à presença/ausência de fatores associados à virulência. Outra importante questão revelada pelo estudo dos genomas foi que, aproximadamente 20% dos genes anotados possuem a função do produto desconhecida e descrita como proteína hipotética. Esses resultados evidenciaram a necessidade de buscar novos genes associados à virulência. Motivados por essa necessidade, nosso grupo de pesquisa já identificou e caracterizou in silico, um gene que codifica para uma proteína autotransportadora, com domínios de adesina, ainda não descrita em APEC. Assim, o objetivo desse projeto é construir uma linhagem APEC mutagenizada, por meio da deleção desta proteína autotransportadora e verificar sua contribuição à patogenicidade, seus efeitos biológicos (capacidades de adesão e invasão de linhagens celulares cultivadas in vitro, produção de biofilme, motilidade, etc) e a sua influência na transcrição gênica global.

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Publicações científicas (4)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
VERMA, RENU; GALVAO ROJAS, THAIS CABRERA; MALUTA, RENATO PARIZ; LEITE, JANAINA LUISA; NAKAZATO, GERSON; DE SILVEIRA, WANDERLEY DIAS. Role of hypothetical protein YicS in the pathogenicity of Avian Pathogenic Escherichia coli in vivo and in vitro. MICROBIOLOGICAL RESEARCH, v. 214, p. 28-36, 2018. Citações Web of Science: 1.
MALUTA, RENATO P.; NICHOLSON, BRYON; LOGUE, CATHERINE M.; NOLAN, LISA K.; ROJAS, THAIS C. G.; DA SILVEIRA, WANDERLEY DIAS. Complete Genomic Sequence of an Avian Pathogenic Escherichia coli Strain of Serotype O7:HNT. MICROBIOLOGY RESOURCE ANNOUNCEMENTS, v. 4, n. 1 JAN-FEB 2016. Citações Web of Science: 1.
VERMA, RENU; GALVAO ROJAS, THAS CABRERA; MALUTA, RENATO PARIZ; LEITE, JANANA LUISA; MENDES DA SILVA, LIVIA PILATTI; NAKAZATO, GERSON; DA SILVEIRA, WANDERLEY DIAS. Fimbria-Encoding Gene yadC Has a Pleiotropic Effect on Several Biological Characteristics and Plays a Role in Avian Pathogenic Escherichia coli Pathogenicity. Infection and Immunity, v. 84, n. 1, p. 187-193, JAN 2016. Citações Web of Science: 3.
MALUTA, RENATO PARIZ; LOGUE, CATHERINE MARY; TIBA CASAS, MONIQUE RIBEIRO; MENG, TING; LOPES GUASTALLI, ELISABETE APARECIDA; GALVAO ROJAS, THAIS CABRERA; MONTELLI, AUGUSTO CEZAR; SADATSUNE, TERUE; RAMOS, MARCELO DE CARVALHO; NOLAN, LISA KAY; DA SILVEIRA, WANDERLEY DIAS. Overlapped Sequence Types (STs) and Serogroups of Avian Pathogenic (APEC) and Human Extra-Intestinal Pathogenic (ExPEC) Escherichia coli Isolated in Brazil. PLoS One, v. 9, n. 8 AUG 12 2014. Citações Web of Science: 56.

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