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Secreção de glicoproteínas heterólogas em Aspergillus: efeito do padrão de glicosilação em parâmetros funcionais de glicosil hidrolases

Processo: 13/18910-3
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Programa BIOEN - Apoio a Jovens Pesquisadores
Vigência (Início): 01 de novembro de 2013
Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2015
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
Pesquisador responsável:André Ricardo de Lima Damasio
Beneficiário:André Ricardo de Lima Damasio
Instituição-sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia, Inovações e Comunicações (Brasil). Campinas , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:12/20549-4 - Secreção de glicoproteínas heterólogas em Aspergillus: efeito do padrão de glicosilação em parâmetros funcionais de glicosil hidrolases, AP.BIOEN.JP
Assunto(s):Glicosilação   Aspergillus nidulans   Secreção   Glicoproteínas

Resumo

Apenas um terço da biomassa de cana de açúcar é processada a etanol, enquanto os outros dois terços são descartados como bagaço e palha. Celulose e hemicelulose são os polímeros mais abundantes no bagaço de cana, e estão organizados de forma muito complexa na parede celular. Celulases e hemicelulases são glicosil hidrolases responsáveis pela completa degradação dos polissacarídeos da parede celular de plantas. A maior fonte de prospecção para produção de enzimas relacionadas a degradação de biomassa são os fungos filamentosos, destacando-se os do gênero Aspergillus. Aspergillus e Trichoderma, são extraordinários em sua capacidade de secretar grandes quantidades de proteínas para o meio de cultura. A maioria das proteínas fúngicas sofre glicosilação co- ou pós-traducional no reticulo endoplasmático (RE) e/ou complexo de Golgi, e portanto são glicoproteínas em sua essência. Contudo, esta proposta versará sobre dois grandes objetivos: 1) Efeito de N-glicanas sobre propriedades funcionais de glicosil hidrolases: Investigaremos possíveis alterações funcionais de variantes não glicosiladas, hipo- e hiper-glicosiladas de uma endo-xilanase GH11 clonada de Penicillium funiculosum. Estas alterações incluem, aumento ou redução de atividade, alteração no padrão de produtos de hidrólise, mudanças em constantes cinéticas (Km e Kcat), alterações na estrutura secundária e variações na especificidade e afinidade a diferentes substratos; 2) Expressão constitutiva de hacA induzido e cpcA (genes envolvidos no stress de RE e unfolded protein response) em A. nidulans: propomos a construção de cepas expressando constitutivamente hacAi e gcn4p/cpcA, verificando de forma sistemática a produção heteróloga de uma proteína alvo, XegA de Aspergillus clavatus (Acla_029940). (AU)

Publicações científicas (6)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
LIMA, MATHEUS S.; DAMASIO, ANDRE R. DE L.; CRNKOVIC, PAULA M.; PINTO, MARCELO R.; DA SILVA, ANA M.; DA SILVA, JEANC. R.; SEGATO, FERNANDO; DE LUCAS, ROSYMAR C.; JORGE, JOAO A.; POLIZELI, MARIA DE L. T. DE M. Co-cultivation of Aspergillus nidulans Recombinant Strains Produces an Enzymatic Cocktail as Alternative to Alkaline Sugarcane Bagasse Pretreatment. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 7, APR 28 2016. Citações Web of Science: 6.
KAUPERT NETO, ANTONIO ADALBERTO; BORIN, GUSTAVO PAGOTTO; GOLDMAN, GUSTAVO HENRIQUE; DE LIMA DAMASIO, ANDRE RICARDO; DE CASTRO OLIVEIRA, JULIANA VELASCO. Insights into the plant polysaccharide degradation potential of the xylanolytic yeast Pseudozyma brasiliensis. FEMS Yeast Research, v. 16, n. 2 MAR 2016. Citações Web of Science: 1.
FURTADO, GILVAN P.; SANTOS, CAMILA R.; CORDEIRO, ROSA L.; RIBEIRO, LUCAS F.; DE MORAES, LUIZ A. B.; DAMASIO, ANDR R. L.; POLIZELI, MARIA DE LOURDES T. M.; LOURENZONI, MARCOS R.; MURAKAMI, MARIO T.; WARD, RICHARD J. Enhanced xyloglucan-specific endo-beta-1,4-glucanase efficiency in an engineered CBM44-XegA chimera. Applied Microbiology and Biotechnology, v. 99, n. 12, p. 5095-5107, JUN 2015. Citações Web of Science: 10.
SEGATO, FERNANDO; DAMASIO, ANDRE R. L.; DE LUCAS, ROSYMAR C.; SQUINA, FABIO M.; PRADE, ROLF A. Genomics Review of Holocellulose Deconstruction by Aspergilli. MICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY REVIEWS, v. 78, n. 4, p. 588-613, DEC 2014. Citações Web of Science: 34.
GOLDBECK, ROSANA; DAMASIO, ANDRE R. L.; GONCALVES, THIAGO A.; MACHADO, CARLA B.; PAIXAO, DOUGLAS A. A.; WOLF, LUCIA D.; MANDELLI, FERNANDA; ROCHA, GEORGE J. M.; RULLER, ROBERTO; SQUINA, FABIO M. Development of hemicellulolytic enzyme mixtures for plant biomass deconstruction on target biotechnological applications. Applied Microbiology and Biotechnology, v. 98, n. 20, p. 8513-8525, OCT 2014. Citações Web of Science: 23.
RIBEIRO, LILIANE F. C.; DE LUCAS, ROSYMAR C.; VITCOSQUE, GABRIELA L.; RIBEIRO, LUCAS F.; WARD, RICHARD J.; RUBIO, MARCELO V.; DAMASIO, ANDRE R. L.; SQUINA, FABIO M.; GREGORY, REBECCA C.; WALTON, PAUL H.; JORGE, JOAO A.; PRADE, ROLF A.; BUCKERIDGE, MARCOS S.; POLIZELI, MARIA DE LOURDES T. M. A novel thermostable xylanase GH10 from Malbranchea pulchella expressed in Aspergillus nidulans with potential applications in biotechnology. BIOTECHNOLOGY FOR BIOFUELS, v. 7, JUL 29 2014. Citações Web of Science: 28.

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