Estudo funcional de novas variações nucleotídicas no gene NR5A1 em pacientes 46,XY com distúrbios da diferenciação do sexo

• Processo: 13/05603-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Vigência (Início): 01 de novembro de 2013
• Vigência (Término): 31 de julho de 2017
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Maricilda Palandi de Mello
• Beneficiário: Helena Fabbri Scallet
• Instituição Sede: Centro de Biologia Molecular e Engenharia Genética (CBMEG). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 13/24333-9 - Estudo funcional de novas variações nucleotídicas no gene NR5A1 em pacientes 46,XY com distúrbios da diferenciação do sexo, BE.EP.DR
• Assunto(s): Genética médica Transtornos do desenvolvimento sexual Transtornos 46, XY do desenvolvimento sexual Disgenesia gonadal Fator esteroidogênico 1 Membro 1 do grupo A da subfamília 5 de receptores nucleares
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: distúrbios da diferenciação do sexo | Gene NR5A1 | Proteína SF1 | Distúrbios da Diferenciação do Sexo

Resumo

O termo Distúrbio da Diferenciação do Sexo (DDS) caracteriza-se pelo desenvolvimento genital ou gonadal incompleto ou desordenado, que leva a uma discordância entre o sexo genético, gonadal e fenotípico do indivíduo afetado. Os DDS com cariótipo 46,XY são caracterizados por genitália externa ambígua ou feminina, em alguns casos com gônadas disgenéticas, e presença ou ausência de derivados de Müller. Os mais frequentes são a insensibilidade androgênica, deficiência da 5-alfa-redutase tipo 2, disgenesia gonadal e DDS ovário-testicular. Vários são os genes que participam dos processos de determinação e diferenciação do sexo. Alterações no gene NR5A1, que codifica o fator de transcrição SF-1, é responsável por diferentes fenótipos de DDS. A proteína SF-1 é expressa principalmente em tecidos esteroidogênicos (gônadas, adrenais e placenta), nas células de Sertoli, nas células de Leydig e nos ovários; é o principal regulador do metabolismo do colesterol nas células esteroidogênicas. Além disso, regula a atividade de outros genes, como os CYPs, HSD3B, StAR, SOX9, DAX1, entre outros. Assim o gene NR5A1 se torna essencial na diferenciação do sexo por sua participação fundamental nos processos de desenvolvimento gonadal e adrenal, além de exercer papéis fisiológicos importantes no núcleo do hipotálamo ventromediano. Na literatura são descritas alterações no gene NR5A1 associadas a DDS 46,XY, anorquia bilateral, amenorréia primária, falência ovariana precoce, hipospádia, infertilidade masculina, e alguns casos de tumores adrenais e endometrioses.No trabalho de Dissertação de Mestrado da aluna Helena Campos Fabbri (solicitante da bolsa de Doutorado) foram identificadas alterações exônicas e intrônicas, bem como alterações em regiões regultadoras do gene NR5A1 em pacientes com DDS 46,XY. Como estas foram descritas pela primeira vez em seu trabalho, a proposta do presente projeto é a avaliação quanto ao efeito funcional destas alterações nucleotídicas. Através da clonagem e expressão do gene NR5A1 mutante serão avaliadas as seguintes mutações: p.Cis65Tir, p.Ser32Asn, p.Cis247*, p.Arg39Cis e p.Asp364Trefs*18 (identificadas na região codificante). Para as mutações c.-133G>A e c.-156_-136ins18pb (identificadas no exon 1 não-codificante) e as c.-413G>A, c.-208C>A e c.-762C>T (identificadas na região 5'UTR) será utilizada a metodologia de Electrophoretic Mobility Sift Assay (EMSA). Para a alteração intrônica c.1138+1G>T será utilizada a técnica de mini-genes. Essas alterações estavam ausentes em 100 indivíduos controles analisados.Apesar de mutações no gene NR5A1 terem sido associadas até pouco tempo atrás a casos de DDS 46,XY e insuficiência adrenal, hoje mais de 50 mutações já foram descritas em casos de DDS 46,XY como única manifestação fenotípica. Desta maneira, este trabalho propõe analisar o efeito funcional de novas mutações no gene NR5A1, averiguando seus papéis em de cada um dos fenótipos de DDS. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

FABBRI, HELENA C.; RIBEIRO DE ANDRADE, JULIANA G.; MACIEL-GUERRA, ANDREA T.; GUERRA-JUNIOR, GIL; DE MELLO, MARICILDA P.. NR5A1 Loss-of-Function Mutations Lead to 46,XY Partial Gonadal Dysgenesis Phenotype: Report of Three Novel Mutations. SEXUAL DEVELOPMENT, v. 10, n. 4, p. 191-199, 2016. (13/05603-5)

FABBRI-SCALLET, HELENA; DE SOUSA, LIZANDRA MAIA; MACIEL-GUERRA, ANDREA TREVAS; GUERRA-JUNIOR, GIL; DE MELLO, MARICILDA PALANDI. Mutation update for the NR5A1 gene involved in DSD and infertility. Human mutation, v. 41, n. 1, p. 58-68, JAN 2020. (15/04763-4, 18/19445-6, 13/05603-5)

FABBRI-SCALLET, HELENA; DE MELLO, MARICILDA PALANDI; GUERRA-JUNIOR, GIL; MACIEL-GUERRA, ANDREA TREVAS; RIBEIRO DE ANDRADE, JULIANA GABRIEL; COSTA DE QUEIROZ, CAMILA MAIA; MONLLEO, ISABELLA LOPES; STRUVE, DAGMAR; HIORT, OLAF; WERNER, RALF. Functional characterization of five NR5A1 gene mutations found in patients with 46,XY disorders of sex development. Human mutation, v. 39, n. 1, p. 114-123, JAN 2018. (13/05603-5, 13/24333-9, 09/08320-9)

FABBRI-SCALLET, HELENA; WERNER, RALF; GUARAGNA, MARA S.; DE ANDRADE, JULIANA G. R.; MACIEL-GUERRA, ANDREA T.; HORNIG, NADINE C.; HIORT, OLAF; GUERRA-JUNIOR, GIL; DE MELLO, MARICILDA P.. Can Non-Coding NR5A1 Gene Variants Explain Phenotypes of Disorders of Sex Development?. SEXUAL DEVELOPMENT, v. N/A, p. 9-pg., 2022-06-28. (13/05603-5, 13/24333-9, 18/19445-6)

FABBRI-SCALLET, HELENA; DE MELLO, MARICILDA PALANDI; GUERRA-JUNIOR, GIL; MACIEL-GUERRA, ANDREA TREVAS; RIBEIRO DE ANDRADE, JULIANA GABRIEL; COSTA DE QUEIROZ, CAMILA MAIA; MONLLEO, ISABELLA LOPES; STRUVE, DAGMAR; HIORT, OLAF; WERNER, RALF. Functional characterization of five NR5A1 gene mutations found in patients with 46,XY disorders of sex development. Human mutation, v. 39, n. 1, p. 10-pg., 2018-01-01. (09/08320-9, 13/05603-5, 13/24333-9)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

SCALLET, Helena Fabbri. Estudo funcional de novas variações nucleotídicas no gene NR5A1 em pacientes 46,XY com distúrbios da diferenciação do sexo. 2017. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia Campinas, SP.