Epidemiologia clássica e molecular de Pseudomonas aeruginosa isoladas de pacientes...
- Auxílios pontuais (curta duração)
| Processo: | 13/13358-0 |
| Linha de fomento: | Bolsas no Brasil - Doutorado Direto |
| Vigência (Início): | 01 de novembro de 2013 |
| Vigência (Término): | 31 de agosto de 2016 |
| Área do conhecimento: | Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada |
| Pesquisador responsável: | Ana Lúcia da Costa Darini |
| Beneficiário: | Natália Candido Caçador |
| Instituição-sede: | Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil |
| Bolsa(s) vinculada(s): | 14/19310-2 - Mutação, crescimento em forma de biofilme e características fenotípicas de Pseudomonas aeruginosa isoladas de pacientes com fibrose cística, BE.EP.DD |
| Assunto(s): | Epidemiologia Epidemiologia molecular Fatores de virulência Mutação Resistência microbiana a medicamentos Pseudomonas aeruginosa Fibrose cística |
Resumo Pseudomonas aeruginosa é a principal bactéria gram-negativa associada a infecções pulmonares em pacientes com Fibrose Cística (FC), contribuindo para uma maior morbidade e mortalidade da doença. Fenótipo bacteriano hipermutante, expressão de fatores de virulência e a notável resistência intrínseca a antibióticos associada à habilidade de aquisição de novos determinantes de resistência, conferem à P. aeruginosa capacidade de causar danos progressivos aos pacientes. No Brasil existem poucos trabalhos relacionados com bactérias isoladas de pacientes fibrocísticos, restringindo a pesquisa a poucos centros de referência de atenção à FC. Nesse contexto, a proposta desse projeto é avaliar linhagens de P. aeruginosa em pacientes com FC atendidos no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo (HCFMRP-USP), investigando fatores de virulência, sensibilidade aos antimicrobianos de interesse clínico-microbiológico, similaridade genômica e ocorrência de linhagens hipermutáveis, ou seja, este projeto visa analisar e relacionar todas as características principais de P. aeruginosa, obtendo-se, assim, uma visão geral e completa dos isolados. Para tal, serão utilizadas metodologias fenotípicas e moleculares para: isolamento e identificação de P. aeruginosa, determinação de resistência a antibióticos e investigação de fatores de virulência. A ocorrência de linhagens bacterianas hipermutantes será determinada pelo método de disco difusão modificado e a frequência de mutação será estimada a partir da resistência à rifampicina apresentada pelos isolados. Por sequenciamento serão detectadas (i) mutações nos genes do sistema de reparo e prevenção de erros no DNA bacteriano; (ii) mutações nos genes do sistema quorum sensing e gene de produção do alginato. A variabilidade genética dos isolados será caracterizada considerando o perfil de macrorrestrição, por eletroforese em campo pulsado. Os isolados serão caracterizados como mucóides ou não mucóides de acordo com morfologia colonial apresentada na primeira cultura e a determinação/avaliação de pacientes com colonização crônica e intermitente será realizada em conjunto com a equipe médica com auxílio dos resultados obtidos pelas técnicas descritas. Espera-se, com os resultados deste projeto, contribuição para maior entendimento da colonização/infecção por P. aeruginosa e contribuição na melhoria da qualidade de vida dos pacientes com FC. (AU) | |