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Biofilmes polimicrobianos: estudo, caracterização, avaliação da patogenicidade em Galleria mellonella, e influência na expressão de genes de virulência de c. albicans

Processo: 13/07411-6
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de novembro de 2013
Vigência (Término): 31 de outubro de 2016
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia
Pesquisador responsável:Antonio Olavo Cardoso Jorge
Beneficiário:Cristiane Aparecida Pereira
Instituição-sede: Instituto de Ciência e Tecnologia (ICT). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José dos Campos. São José dos Campos , SP, Brasil
Assunto(s):Bactérias   Genes   Biofilmes   Leveduras   Galleria mellonella   Microbiologia

Resumo

Apesar do crescente aumento de pesquisas com biofilmes, pouco se sabe sobre o comportamento de comunidades microbianas mistas, particularmente em interações entre fungos e bactérias. Para a compreensão das doenças infecciosas e desenvolvimento de novos medicamentos e estratégicas terapêuticas, torna-se necessário estudos in vitro e in vivo de modelos de biofilmes polimicrobianos. O objetivo desse estudo será caracterizar os biofilmes polimicrobianos, in vitro, formados por Candida albicans, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis e Pseudomonas aeruginosa; avaliar a patogenicidade da interação entre esses micro-organismos no modelo experimental de invertebrado Galleria mellonella e na expressão de genes de virulência de C. albicans. O presente projeto será dividido em cinco etapas. Na etapa A, os biofilmes polimicrobianos serão estudados e caracterizados através dos seguintes testes: quantificação de células viáveis e células desprendidas do biofilme, atividade metabólica pelo ensaio colorimétrico com XTT; análise da biomassa (peso seco); e, ensaio de bactérias aderidas a hifas. Na etapa B, os biofilmes serão analisados microscopicamente através de microscopia eletrônica de varredura e microscopia confocal de varredura a laser. A ação da enzima liticase na integridade dos biofilmes polimicrobianos será realizada na etapa C do projeto. Estudos in vivo da patogenicidade microbiana no modelo experimental de G. mellonella serão realizados na etapa D, através da curva de sobrevivência desta larva e quantificação dos micro-organismos. A influência dos biofilmes polimicrobianos na expressão de genes de virulência de C. albicans será avaliada na etapa E. A análise estatística dos resultados obtidos no presente estudo será realizada com auxílio do software Minitab, considerando diferença estatisticamente significante quando o valor de p for menor que 0.05.

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DO ROSARIO PALMA, ANA LUIZA; DE PAULA-RAMOS, LUCAS; DOMINGUES, NADIA; BACK-BRITO, GRAZIELLA NUERNBERG; DE OLIVEIRA, LUCIANE DIAS; PEREIRA, CRISTIANE APARECIDA; CARDOSO JORGE, ANTONIO OLAVO. Biofilms of Candida albicans and Streptococcus sanguinis and their susceptibility to antimicrobial effects of photodynamic inactivation. Photodiagnosis and Photodynamic Therapy, v. 24, p. 95-101, DEC 2018. Citações Web of Science: 1.
PEREIRA, CRISTIANE APARECIDA; DOMINGUES, NADIA; SANTOS ALVES ARAUJO, MARIA IZABEL DANIEL; JUNQUEIRA, JULIANA CAMPOS; BACK-BRITO, GRAZIELLA NUERNBERG; CARDOSO JORGE, ANTONIO OLAVO. Production of virulence factors in Candida strains isolated from patients with denture stomatitis and control individuals. DIAGNOSTIC MICROBIOLOGY AND INFECTIOUS DISEASE, v. 85, n. 1, p. 66-72, MAY 2016. Citações Web of Science: 4.
PEREIRA, CRISTIANE APARECIDA; DOMINGUES, NADIA; SILVA, MICHELLE PENELUPPI; BORGES PEREIRA COSTA, ANNA CAROLINA; JUNQUEIRA, JULIANA CAMPOS; CARDOSO JORGE, ANTONIO OLAVO. Photodynamic inactivation of virulence factors of Candida strains isolated from patients with denture stomatitis. JOURNAL OF PHOTOCHEMISTRY AND PHOTOBIOLOGY B-BIOLOGY, v. 153, p. 82-89, DEC 2015. Citações Web of Science: 4.

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