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Expressão de fatores de virulência de diferentes espécies de Candida: confiabilidade dos métodos microbiológicos e efeito do tratamento fotodinâmico

Processo: 13/16677-0
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de janeiro de 2014
Vigência (Término): 30 de setembro de 2015
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia
Pesquisador responsável:Lívia Nordi Dovigo
Beneficiário:Paula Tamião Arantes
Instituição Sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
Assunto(s):Fatores de virulência   Candida   Confiabilidade   Terapia fotodinâmica
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Candida spp | confiabilidade | Fatores de virulência | Terapia Fotodinâmica | Bioestatística; Microbiologia Aplicada

Resumo

O potencial de aplicação da Terapia Fotodinâmica (PDT) para inativação de espécies de Candida vem sendo amplamente explorado. Se a aplicação da PDT atuasse sobre as células de Candida promovendo diminuição na virulência, a utilização desta terapia poderia ser indicada com mais segurança. Além disso, avaliar a precisão da medida dos fatores de virulência torna-se fundamental para se reduzir a introdução de vieses que certamente influenciarão na variabilidade dos resultados e consequentemente no cálculo do tamanho da amostra e poder dos testes estatísticos empregados. O presente projeto pretende realizar dois estudos. O Estudo I terá objetivo estabelecer um protocolo reprodutível da metodologia da produção de enzimas degradativas. Serão utilizadas suspensões fúngicas padronizadas da espécie C. albicans e a metodologia de produção de enzimas seguirá recomendações publicadas (n=30). Como variáveis dependentes têm-se as medidas da razão entre a medida do diâmetro da colônia e a medida do diâmetro do halo de precipitação (Pz) para a produção de fosfolipase (Pz-f) e de proteinase (Pz-p). Como variáveis independentes serão consideradas: i. forma de leitura dos halos de precipitação, ii. fundo para leitura. A concordância intra e inter-examinadores das medidas de Pz será estimada por meio do Coeficiente de Correlação Intraclasse (CCI). No Estudo II, serão realizados os ensaios laboratoriais para avaliar a confiabilidade das medidas efetuadas para os demais fatores de virulência (capacidade de adesão e formação de biofilme) e análise da expressão da virulência para as espécies C. albicans, C. glabrata, C. tropicalis e C. krusei em amostras submetidas a PDT mediada pela curcumina. Como variáveis dependentes têm-se as unidades formadoras de colônia por mililitro (UFC/mL), o metabolismo celular (XTT), a biomassa (cristal violeta), Pz-f e Pz-p; como variável independente a aplicação da PDT em dois níveis (com e sem aplicação). O tamanho amostral será definido após estudo piloto. A concordância intra e inter-examinador (UFC/mL, XTT e CV) será estimada com o CCI. As variáveis dependentes UFC/ml, XTT e CV serão avaliadas separadamente e a comparação dos valores médios segundo a variável independente será realizada por meio do teste t Student quando atendidos os pressupostos de normalidade e homocedasticidade. A associação da PDT (+/-) na expressão das enzimas degradativas será avaliada por meio do teste de qui-quadrado para cada espécie de Candida. O nível de significância a ser adotado para tomada de decisão será de 5%.

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ARANTES, PAULA TAMIAO; SANITA, PAULA VOLPATO; SANTEZI, CAROLINA; BARBEIRO, CAMILA DE OLIVEIRA; REINA, BARBARA DONADON; VERGANI, CARLOS EDUARDO; DOVIGO, LIVIA NORDI. Reliability of the agar based method to assess the production of degradative enzymes in clinical isolates of Candida albicans. Medical Mycology, v. 54, n. 3, p. 266-274, . (13/16677-0, 12/21251-9)
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
ARANTES, Paula Tamião. Expressão dos fatores de virulência em Candida albicans: confiabilidade dos métodos microbiológicos e efeito do tratamento fotodinâmico. 2015. Dissertação de Mestrado - Universidade Estadual Paulista (Unesp). Faculdade de Odontologia. Araraquara Araraquara.

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