Infecção por Toxoplasma gondii: caracterização sorológica e molecular em pacientes atendidos pelo SUS

• Processo: 13/15879-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de março de 2014
• Data de Término da vigência: 29 de fevereiro de 2016
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Saúde Coletiva - Epidemiologia
• Pesquisador responsável: Cinara de Cássia Brandão
• Beneficiário: Fernando Henrique Antunes Murata
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto (FAMERP). Secretaria de Desenvolvimento Econômico (São Paulo - Estado). São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Epidemiologia molecular Genótipo Reação em cadeia por polimerase (PCR) Toxoplasmose Toxoplasmose ocular Toxoplasma gondii Técnicas e procedimentos de laboratório
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Diagnóstico laboratorial | Genotipos | Pcr | Toxoplasma gondii | toxoplasmose | toxoplasmose ocular | Epidemiologia molecular

Resumo

A toxoplasmose, uma doença resultante da infecção por Toxoplasma gondii, manifesta-se clinicamente nas formas cerebral, congênita e ocular. A prevalência desta doença varia nas diferentes áreas ao redor do mundo e depende de vários fatores. Estudos epidemiológicos realizados em diferentes estados brasileiros nas últimas décadas revelaram grande variabilidade nos índices de infecção por T. gondii. Nos últimos anos nosso grupo revelou que os índices de infecção por T. gondii em gestantes da região noroeste do Estado de São Paulo são de aproximadamente 65,0%, que o índice de infecção congênita em São José do Rio Preto, SP é de 2,3% e de toxoplasmose ocular é de aproximadamente 27% entre pacientes portadores de doenças oculares. A caracterização gênica do T. gondii realizada em amostras humanas revela uma grande diversidade e tenta-se esclarecer a relação entre as diferentes cepas e a infecção humana, inclusive de nossa região. O objetivo geral deste projeto é investigar e caracterizar a infecção por T. gondii em seus aspectos sorológicos e moleculares na região noroeste do Estado de São Paulo. Seus objetivos específicos compreendem: 1.Validar os testes sorológicos comerciais utilizados na identificação de anticorpos anti-T. gondii em grupos de pacientes com suspeita ou diagnóstico clínico de toxoplasmose ocular, congênita ou gestacional; 2. Avaliar nestes pacientes a aplicabilidade do cPCR, Nested PCR e qPCR em amostras biológicas (sangue periférico e liquido amniótico); 3. Caracterizar genotipicamente as cepas de T. gondii da região com o uso do método de PCR-RFLP e estabelecer relação com o quadro clínico dos pacientes acometidos (Parceria exterior). Serão selecionadas amostras de soro e DNA genômico de pacientes com diagnóstico clínico de toxoplasmose ocular, gestacional e congênita, estocadas no Laboratório de Imunogenética do Departamento de Biologia Molecular da FAMERP, cujos dados epidemiológicos dos respectivos pacientes foram coletados. Os métodos comerciais ELISA (DiaSorin), ELFA (Biomerieux) e MEIA (Abbot) serão utilizados para a identificação de anticorpos IgA, IgM e IgG anti-T. gondii e a identificação do DNA genômico do T. gondii será realizada com o uso dos métodos PCR convencional, PCR nested, PCR Tempo Real e PCR-RFLP. Os resultados das análises sorológicas e moleculares serão comparados. Os testes estatísticos Ç2 (com correção de Yates), o teste exato de Fisher e o test t (quando for o caso) serão utilizados nas comparações. Também será calculado o Odds Ratio e o intervalo de confiança a 95%, quando necessários. A sensibilidade, a especificidade e os valores preditivos positivos (VPP) e negativos (VPN) também serão calculados para cada teste sorológico e molecular empregado nas análises. Os resultados poderão contribuir para se compreender a importância da adoção de medidas de prevenção da infecção por T. gondii, além de identificar o tipo de cepa que afetam os pacientes da região. Também poderão orientar programas de esclarecimento, educação, prevenção, epidemiologia e mesmo tratamento das diversas formas de toxoplasmose na região noroeste do Estado de São Paulo.

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MURATA, FERNANDO HENRIQUE ANTUNES; PREVIATO, MARIANA; FREDERICO, FABIO BATISTA; BARBOSA, AMANDA PIRES; NAKASHIMA, FABIANA; DE FARIA, JR., GERALDO MAGELA; SILVEIRA CARVALHO, APARECIDA PERPETUO; MEIRA STREJEVITCH, CRISTINA DA SILVA; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; CASTIGLIONI, LILIAN; et al. Evaluation of Serological and Molecular Tests Used for the Identification of Toxoplasma gondii Infection in Patients Treated in an Ophthalmology Clinic of a Public Health Service in Sao Paulo State, Brazil. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 9, FEB 7 2020. (12/07716-9, 14/05302-8, 13/15879-8, 12/07750-2, 13/10050-5, 18/09448-8, 18/04709-8)

AYO, CHRISTIANE MARIA; DA SILVEIRA CAMARGO, ANA VITORIA; FREDERICO, FABIO BATISTA; SIQUEIRA, RUBENS CAMARGO; PREVIATO, MARIANA; ANTUNES MURATA, FERNANDO HENRIQUE; SILVEIRA-CARVALHO, APARECIDA PERPETUO; BARBOSA, AMANDA PIRES; BRANDAO DE MATTOS, CINARA DE CASSIA; DE MATTOS, LUIZ CARLOS. MHC Class I Chain-Related Gene A Polymorphisms and Linkage Disequilibrium with HLA-B and HLA-C Alleles in Ocular Toxoplasmosis. PLoS One, v. 10, n. 12, DEC 16 2015. (13/15879-8, 13/25650-8, 13/06580-9, 13/10050-5, 09/17540-2, 15/13723-6)

MEIRA-STREJEVITCH, CRISTINA SILVA; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; MAIA, MARTA MARQUES; CARNIETTO DE HIPPOLITO, DAISE DAMARIS; WANG, HUI-TZU LIN; MOTOIE, GABRIELA; DE SOUZA GOMES, APARECIDA HELENA; KANAMURA, CRISTINA TAKAMI; MARTINES, ROOSECELIS BRASIL; BRANDAO DE MATTOS, CINARA CASSIA; et al. Reference genes for studies in infectious parasitic diseases in five types of human tissues. GENE REPORTS, v. 7, p. 98-105, JUN 2017. (13/15879-8, 13/05811-7, 13/25650-8, 13/10050-5, 14/09496-1, 15/04803-6)

AYO, CHRISTIANE MARIA; FREDERICO, FABIO BATISTA; SIQUEIRA, RUBENS CAMARGO; BRANDAO DE MATTOS, CINARA DE CASSIA; PREVIATO, MARIANA; BARBOSA, AMANDA PIRES; ANTUNES MURATA, FERNANDO HENRIQUE; SILVEIRA-CARVALHO, APARECIDA PERPETUO; DE MATTOS, LUIZ CARLOS. Ocular toxoplasmosis: susceptibility in respect to the genes encoding the KIR receptors and their HLA class I ligands. SCIENTIFIC REPORTS, v. 6, NOV 9 2016. (13/15879-8, 13/25650-8, 13/06580-9, 13/10050-5, 09/17540-2)

ANTUNES MURATA, FERNANDO HENRIQUE; FERREIRA, MARINA NEVES; CAMARGO, NATALIA SAHYOUN; SANTOS, GABRIELA SORIA; JUNQUEIRA FRANCO SPEGIORIN, LIGIA COSENTINO; SILVEIRA-CARVALHO, APARECIDA PERPETUO; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; DE MATTOS, LUIZ CARLOS; BRANDAO DE MATTOS, CINARA CASSIA. Frequency of anti-Toxoplasma gondii IgA, IgM, and IgG antibodies in high-risk pregnancies, in Brazil. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 49, n. 4, p. 512-514, JUL-AUG 2016. (12/07716-9, 13/15879-8, 14/01706-7, 14/09496-1)

FERNANDO HENRIQUE ANTUNES MURATA; MARINA NEVES FERREIRA; NATÁLIA SAHYOUN CAMARGO; GABRIELA SORIA SANTOS; LÍGIA COSENTINO JUNQUEIRA FRANCO SPEGIORIN; APARECIDA PERPÉTUO SILVEIRA-CARVALHO; VERA LUCIA PEREIRA-CHIOCCOLA; LUIZ CARLOS DE MATTOS; CINARA CÁSSIA BRANDÃO DE MATTOS. Frequency of anti- Toxoplasma gondii IgA, IgM, and IgG antibodies in high-risk pregnancies, in Brazil. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 49, n. 4, p. 512-514, 2016-08-00. (14/01706-7, 13/15879-8, 12/07716-9)

NAKASHIMA, FABIANA; PARDO, VALQUIRIA SOUSA; MIOLA, MARCOS PAULO; ANTUNES MURATA, FERNANDO HENRIQUE; PADUAN, NATALIA; LONGO, STEFANI MIQUELINE; BRANDAO DE MATTOS, CINARA CASSIA; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; RICCI, OCTAVIO; DE MATTOS, LUIZ CARLOS. Serum IgG Anti-Toxoplasma gondii Antibody Concentrations Do Not Correlate Nested PCR Results in Blood Donors. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 9, JAN 14 2020. (12/07716-9, 12/07750-2, 13/15879-8, 14/00900-4, 11/13939-8)

CAMILO, LILIAN MUNIZ; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; GAVA, RICARDO; MEIRA-STREJEVITCH, CRISTINA DA SILVA; VIDAL, JOSE ERNESTO; BRANDAO DE MATTOS, CINARA CASSIA; FREDERICO, FABIO BATISTA; DE MATTOS, LUIZ CARLOS; JUNQUEIRA FRANCO SPEGIORIN, LIGIA COSENTINO; ANTUNES MURATA, FERNANDO HENRIQUE; et al. Molecular diagnosis of symptomatic toxoplasmosis: a 9-year retrospective and prospective study in a referral laboratory in São Paulo, Brazil. Brazilian Journal of Infectious Diseases, v. 21, n. 6, p. 638-647, NOV-DEC 2017. (13/15879-8, 13/25650-8, 13/10050-5, 14/09496-1, 14/01706-7)

DE FARIA JUNIOR, GERALDO M.; AYO, CHRISTIANE M.; DE OLIVEIRA, AMANDA P.; LOPES, ALESSANDRO G.; FREDERICO, FABIO B.; SILVEIRA-CARVALHO, APARECIDA P.; PREVIATO, MARIANA; BARBOSA, AMANDA P.; MURATA, FERNANDO H. A.; DE ALMEIDA JUNIOR, GILDASIO CASTELLO; et al. CCR5 chemokine receptor gene polymorphisms in ocular toxoplasmosis. Acta Tropica, v. 178, p. 276-280, FEB 2018. (13/10050-5, 09/17540-2, 13/15879-8, 15/17226-7)

ANTUNES MURATA, FERNANDO HENRIQUE; FERREIRA, MARINA NEVES; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; JUNQUEIRA FRANCO SPEGIORIN, LIGIA COSENTINO; MEIRA-STREJEVITCH, CRISTINA DA SILVA; GAVA, RICARDO; SILVEIRA-CARVALHO, APARECIDA PERPETUO; DE MATTOS, LUIZ CARLOS; BRANDAO DE MATTOS, CINARA CASSIA; GRP, FAMERP TOXOPLASMA RES. Evaluation of serological and molecular tests used to identify Toxoplasma gondii infection in pregnant women attended in a public health service in Sao Paulo state, Brazil. DIAGNOSTIC MICROBIOLOGY AND INFECTIOUS DISEASE, v. 89, n. 1, p. 13-19, SEP 2017. (12/07716-9, 14/05302-8, 13/15879-8, 12/07750-2, 14/09496-1, 14/01706-7)

MAIA, M. M.; MEIRA-STREJEVITCH, C. S.; PEREIRA-CHIOCCOLA, V. L.; DE HIPPOLITO, D. D. C.; SILVA, V. O.; BRANDAO DE MATTOS, C. C.; FREDERICO, F. B.; SIQUEIRA, R. C.; DE MATTOS, L. C.; GRP, FAMERP IAL TOXOPLASMA RES. Evaluation of gene expression levels for cytokines in ocular toxoplasmosis. PARASITE IMMUNOLOGY, v. 39, n. 10, OCT 2017. (13/15879-8, 13/25650-8, 13/10050-5, 14/09496-1, 15/04803-6)