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Expressão de genes das vias anabólicas e catabólicas e de microRNAs no músculo esquelético do pacu (Piaractus mesopotamicus) durante período de jejum e realimentação

Processo: 13/25915-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de abril de 2014
Vigência (Término): 31 de março de 2017
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Recursos Pesqueiros e Engenharia de Pesca - Aquicultura
Pesquisador responsável:Maeli Dal Pai
Beneficiário:Tassiana Gutierrez de Paula
Instituição-sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Assunto(s):Sistema musculoesquelético   Músculo esquelético   Peixes   Expressão gênica   Fatores de crescimento

Resumo

O músculo esquelético nos peixes corresponde a maior parte da massa corporal, e o crescimento ocorre por hipertrofia e/ou hiperplasia das fibras, processos que variam com a espécie, fase de desenvolvimento e estado nutricional. O desenvolvimento, crescimento e o fenótipo muscular envolve a ativação ou inibição de vias de sinalização, responsáveis pelo controle da atividade das vias catabólicas e anabólicas do tecido muscular. Com base nessas informações, estudos que buscam elucidar as vias de sinalização e os mecanismos celulares e moleculares envolvidos com o controle da massa muscular são fundamentais para um melhor esclarecimento sobre a real contribuição dessas vias no crescimento muscular, em condições que ocorre uma alteração na homeostase entre os estados catabólico e anabólico, como em situações de restrição alimentar e realimentação. O objetivo desse trabalho é avaliar na musculatura de juvenis de pacu (300g) submetidos a um período de jejum (10 dias) e realimentação de 05 dias: (a): a morfologia e a morfometria das fibras musculares; (b) a expressão gênica de componentes das vias do catabolismo (Foxo - MuRF - MAFbx) e anabolismo (IGF - PI3K - AKT - mTOR) e dos fatores transcricionais da família MyoD (MyoD, MyF5, miogenina e MRF4); (c) o perfil de expressão dos MicroRNAs músculo específicos (miR-1, miR-133a, miR-133b, miR-206 e miR-499) e seus genes alvo mais expressos, in vivo e (d) os MicroRNAs diferencialmente expressos e os genes alvo após o silenciamento dessas pequenas moléculas, em cultura primária de mioblastos. Os peixes serão cultivados em caixas d'agua de 0,5 m³ dotadas de sistemas de recirculação distintas. Amostras de músculo vermelho e branco serão retiradas (n=10), a cada 2 dias de jejum e 6 horas de realimentação. Tanto nos experimentos in vivo quanto in vitro, a expressão dos genes selecionados e dos microRNAs será realizada por Reação em Cadeia da Polimerase após Transcrição Reversa em Tempo Real (RT-qPCR). O silenciamento dos microRNAs mais expressos in vivo nos músculos vermelho e branco durante o período de jejum, será realizado, in vitro, utilizando-se oligonucleotídeos antisense inibidores. Os dados obtidos serão submetidos a análises estatísticas adequadas após a realização dos testes de normalidade e homocedasticidade.

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DE PAULA, TASSIANA GUTIERREZ; THOMAZINI ZANELLA, BRUNA TEREZA; DE ALMEIDA FANTINATTI, BRUNO EVARISTO; DE MORAES, LEONARDO NAZARIO; DA SILVA DURAN, BRUNO OLIVEIRA; DE OLIVEIRA, CAROLINE BREDARIOL; SIMOES SALOMAO, RONDINELLE ARTUR; DA SILVA, RAFAELA NUNES; PADOVANI, CARLOS ROBERTO; DOS SANTOS, VANDER BRUNO; MARECO, EDSON ASSUNCAO; CARVALHO, ROBSON FRANCISCO; DAL-PAI-SILVA, MAELI. Food restriction increase the expression of mTORC1 complex genes in the skeletal muscle of juvenile pacu (Piaractus mesopotamicus). PLoS One, v. 12, n. 5 MAY 15 2017. Citações Web of Science: 7.
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
PAULA, Tassiana Gutierrez de. Expressão de genes das vias anabólicas e catabólicas e de miRNas no músculo esquelético do Piaractus mesopotamicus durante período de jejum e realimentação. 2017. Tese de Doutorado - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Instituto de Biociências (Campus de Botucatu)..

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