Efeitos de interações proteína-meio aquoso em modificações estruturais da L- Asparaginase II de escherichia coli

• Processo: 13/24024-6
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Vigência (Início): 01 de março de 2014
• Vigência (Término): 31 de agosto de 2017
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Gisele Monteiro
• Beneficiário: Samarina Rodrigues Wlodarczyk
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Asparaginase Escherichia coli Sistema de duas fases aquosas Biofármacos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: agregacao de proteinas | asparaginase | Biofármaco | Erwinia chrysanthemi | osmólitos | Biologia Molecular e Engenharia de Proteínas

Resumo

A L- Asparaginase é uma enzima aplicada para o tratamento de diversos tipos de câncer, principalmente, a Leucemia Linfoide Aguda. Comercialmente, é produzida pelos micro-organismos Escherichia coli e Erwinia chrysanthemi pela indução da produção da proteína nativa ou pela expressão da proteína recombinante. A enzima catalisa a conversão da L- asparagina em L- aspartato e amônia, privando a célula tumoral de um aminoácido essencial para o seu crescimento. As versões disponíveis no mercado para tratamento passam por um processo de produção que requer melhorias. A formação de agregados proteicos é um dos principais problemas que afetam a formulação da L- Asparaginase. Estes podem dificultar a purificação da proteína bioativa, causar a perda da atividade proteica e até provocar o aumento da resposta imune ao biofármaco. O presente projeto terá o objetivo principal de analisar o comportamento da proteína L- Asparaginase em diferentes Sistemas Aquosos bifásicos (SAB), similares ao meio orgânico, e os fatores que regem a sua agregação. As polarizabilidade/dipolaridade, acidez e basicidade da L- Asparaginase serão estimadas por meio de análise solvatocrômica e geração de descritores para esta enzima. Os efeitos de mutações sítio-dirigidas na proteína também serão avaliados em SAB. Os resultados poderão auxiliar a compreensão de funções biológicas e transporte de proteínas, e otimizar o desenvolvimento de biofármacos. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

WLODARCZYK, SAMARINA R.; CUSTODIO, DEBORA; PESSOA JR, ADALBERTO; MONTEIRO, GISELE. Influence and effect of osmolytes in biopharmaceutical formulations. EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACEUTICS AND BIOPHARMACEUTICS, v. 131, p. 92-98, OCT 2018. (15/24463-5, 13/08617-7, 13/24024-6, 15/07749-2)

WLODARCZYK, SAMARINA R.; COSTA-SILVA, TALES A.; PESSOA-JR, ADALBERTO; MADEIRA, PEDRO; MONTEIRO, GISELE. Effect of osmolytes on the activity of anti-cancer enzyme L-Asparaginase II from Erwinia chrysanthemi. Process Biochemistry, v. 81, p. 123-131, JUN 2019. (13/24024-6, 15/07749-2)