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Identificação de antígenos protéicos homólogos em Salmonella enterica subesp. enterica sorovares Typhimurium, enteritidis, Heidelberg e Schwarzengrund, para a produção de proteína recombinante e avaliação como candidato vacinal em galinhas

Processo: 13/26122-5
Linha de fomento:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 10 de junho de 2014
Vigência (Término): 09 de junho de 2015
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Patologia Animal
Pesquisador responsável:Angelo Berchieri Junior
Beneficiário:Rafael Antonio Casarin Penha Filho
Supervisor no Exterior: Yung-Fu Chang
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
Local de pesquisa : Cornell University, Estados Unidos  
Vinculado à bolsa:12/24017-7 - Avaliação da infecção e imunidade de linhagens de aves (Gallus Gallus) suscetíveis e resistentes ao desafio por Salmonella enterica subesp. enterica sorovar Gallinarum, BP.PD
Assunto(s):Biologia computacional   Microbiologia   Salmonella enterica   Salmonella heidelberg   Salmonella typhimurium   Vacinas   Galinhas

Resumo

As salmoneloses são doenças frequentes em lotes de aves comerciais onde há falhas no programa de biossegurança. Durante os últimos anos, a vacinação tem sido amplamente utilizada em lotes de aves comerciais no Brasil para o controle de infecções por Salmonella spp. Existem diversas vacinas vivas disponíveis para o controle de S. Gallinarum, S. Typhimurium e S. Enteritidis em aves. No entanto, as vacinas vivas ou inativadas contra os sorovares flagelados, que causam o paratífo (ex. S. Enteritidis) geram uma proteção parcial nas aves principalmente quando se busca o controle da colonização intestinal e excreção fecal.Sorovares emergentes de Salmonella enterica (ex. S. Heidelberg e S. Schwarzengrund) estão com prevalência aumentada nas criações avícolas comerciais em diversos países, incluindo o Brasil. Consequentemente a contaminação dos produtos avícolas (ovos, carnes e derivados) e o risco de infecção dos seres humanos por estes sorovares flagelados também se elevou. Isso posto, é importante o estudo de novas metodologias que possam gerar ferramentas para o controle desses novos desafios de forma eficaz e rápida. A utilização de proteínas recombinantes em formulações de vacinas tem sido estudada para o controle de diversos patógenos. No entanto, a utilização dessa metodologia para a produção de antígenos imunogênicos, com capacidade de gerar proteção cruzada entre diferentes sorovares de Salmonella, é uma abordagem pouco estudada em aves. No projeto proposto, serão utilizadas ferramentas de bioinformática para realizar a comparação de sequências de aminoácidos, de proteínas imunogênicas de S. Typhimurium, que também estão presentes nos sorovares S. Enteritidis, S. Heidelberg e S. Schwarzengrund. Dessa forma, a proteína com maior homologia entre os quatro sorovares será selecionada para produção e purificação como proteína recombinante, utilizando a técnica de clonagem e expressão em E. coli. Após a produção da proteína recombinante, o potencial vacinal desta será testado em galinhas comerciais. As aves serão divididas em dois grupos A e B. No grupo A, as aves não serão vacinadas. No grupo B, as aves serão vacinadas com 100 µg de proteína recombinantes eluídas em adjuvante (EMULSIGEN) no 5 e 25º dia de vida. Todas as aves do grupo A e B serão desafiadas com S. Typhimurium aos 30 dias de vida. Ao 2º e 5º dia pós-infecção, serão eutanasiadas 3 aves de cada grupo, para avaliar a infecção pela estirpe desafio, através da contagem bacteriana em baço, fígado e conteúdo cecal. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
CASARIN PENHA FILHO, RAFAEL ANTONIO; ACELAS DIAZ, SILVIA JULIANA; MEDINA, TIAGO DA SILVA; CHANG, YUNG-FU; DA SILVA, JOAO SANTANA; BERCHIERI, JR., ANGELO. Evaluation of protective immune response against fowl typhoid in chickens vaccinated with the attenuated strain Salmonella Gallinarum Delta cobS Delta cbiA. Research in Veterinary Science, v. 107, p. 220-227, AUG 2016. Citações Web of Science: 2.
CASARIN PENHA FILHO, RAFAEL ANTONIO; FERREIRA, JOSEANE CRISTINA; IBA KANASHIRO, ANA MARIA; DA COSTA DARINI, ANA LUCIA; BERCHIERI JUNIOR, ANGELO. Antimicrobial susceptibility of Salmonella Gallinarum and Salmonella Pullorum isolated from ill poultry in Brazil. Ciência Rural, v. 46, n. 3, p. 513-518, MAY 2016. Citações Web of Science: 8.

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