Identificação de antígenos protéicos homólogos em Salmonella enterica subesp. enterica sorovares Typhimurium, enteritidis, Heidelberg e Schwarzengrund, para a produção de proteína recombinante e avaliação como candidato vacinal em galinhas

• Processo: 13/26122-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 10 de junho de 2014
• Data de Término da vigência: 09 de junho de 2015
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Patologia Animal
• Pesquisador responsável: Angelo Berchieri Junior
• Beneficiário: Rafael Antonio Casarin Penha Filho
• Supervisor: Yung-Fu Chang
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Instituição Anfitriã: Cornell University, Estados Unidos
• Vinculado à bolsa: 12/24017-7 - Avaliação da infecção e imunidade de linhagens de aves (Gallus gallus) suscetíveis e resistentes ao desafio por Salmonella enterica subesp. enterica sorovar Gallinarum, BP.PD
• Assunto(s): Biologia computacional Microbiologia Salmonella enterica Salmonella heidelberg Salmonella typhimurium Vacinas Galinhas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: galinhas | proteína recombinante | Salmonella enterica | salmoneloses aviárias | Vacina | Microbiologia

Resumo

As salmoneloses são doenças frequentes em lotes de aves comerciais onde há falhas no programa de biossegurança. Durante os últimos anos, a vacinação tem sido amplamente utilizada em lotes de aves comerciais no Brasil para o controle de infecções por Salmonella spp. Existem diversas vacinas vivas disponíveis para o controle de S. Gallinarum, S. Typhimurium e S. Enteritidis em aves. No entanto, as vacinas vivas ou inativadas contra os sorovares flagelados, que causam o paratífo (ex. S. Enteritidis) geram uma proteção parcial nas aves principalmente quando se busca o controle da colonização intestinal e excreção fecal.Sorovares emergentes de Salmonella enterica (ex. S. Heidelberg e S. Schwarzengrund) estão com prevalência aumentada nas criações avícolas comerciais em diversos países, incluindo o Brasil. Consequentemente a contaminação dos produtos avícolas (ovos, carnes e derivados) e o risco de infecção dos seres humanos por estes sorovares flagelados também se elevou. Isso posto, é importante o estudo de novas metodologias que possam gerar ferramentas para o controle desses novos desafios de forma eficaz e rápida. A utilização de proteínas recombinantes em formulações de vacinas tem sido estudada para o controle de diversos patógenos. No entanto, a utilização dessa metodologia para a produção de antígenos imunogênicos, com capacidade de gerar proteção cruzada entre diferentes sorovares de Salmonella, é uma abordagem pouco estudada em aves. No projeto proposto, serão utilizadas ferramentas de bioinformática para realizar a comparação de sequências de aminoácidos, de proteínas imunogênicas de S. Typhimurium, que também estão presentes nos sorovares S. Enteritidis, S. Heidelberg e S. Schwarzengrund. Dessa forma, a proteína com maior homologia entre os quatro sorovares será selecionada para produção e purificação como proteína recombinante, utilizando a técnica de clonagem e expressão em E. coli. Após a produção da proteína recombinante, o potencial vacinal desta será testado em galinhas comerciais. As aves serão divididas em dois grupos A e B. No grupo A, as aves não serão vacinadas. No grupo B, as aves serão vacinadas com 100 µg de proteína recombinantes eluídas em adjuvante (EMULSIGEN) no 5 e 25º dia de vida. Todas as aves do grupo A e B serão desafiadas com S. Typhimurium aos 30 dias de vida. Ao 2º e 5º dia pós-infecção, serão eutanasiadas 3 aves de cada grupo, para avaliar a infecção pela estirpe desafio, através da contagem bacteriana em baço, fígado e conteúdo cecal. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

CASARIN PENHA FILHO, RAFAEL ANTONIO; FERREIRA, JOSEANE CRISTINA; IBA KANASHIRO, ANA MARIA; DA COSTA DARINI, ANA LUCIA; BERCHIERI JUNIOR, ANGELO. Suscetibilidade a antimicrobianos de Salmonella Gallinarum e Salmonella Pullorum isolados de aves doentes no Brasil. Ciência Rural, v. 46, n. 3, p. 513-518, MAY 2016. (12/24017-7, 13/26122-5)

CASARIN PENHA FILHO, RAFAEL ANTONIO; ACELAS DIAZ, SILVIA JULIANA; MEDINA, TIAGO DA SILVA; CHANG, YUNG-FU; DA SILVA, JOAO SANTANA; BERCHIERI, JR., ANGELO. Evaluation of protective immune response against fowl typhoid in chickens vaccinated with the attenuated strain Salmonella Gallinarum Delta cobS Delta cbiA. Research in Veterinary Science, v. 107, p. 220-227, AUG 2016. (13/26127-7, 12/24017-7, 13/26122-5)