O papel dos microRNAs na proliferação e diferenciação celular da linhagem pluripotente de carcinoma embrionário humano NTera-2

• Processo: 13/27061-0
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Vigência (Início): 01 de maio de 2014
• Vigência (Término): 30 de setembro de 2017
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Rodrigo Alexandre Panepucci
• Beneficiário: Ildercílio Mota de Souza Lima
• Instituição Sede: Hemocentro de Ribeirão Preto. Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto da USP (HCMRP). Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 13/08135-2 - CTC - Centro de Terapia Celular, AP.CEPID
• Bolsa(s) vinculada(s): 15/15864-6 - Avaliação funcional de microRNAs na proliferação e diferenciação celular da linhagem de carcinoma embrionário NTera-2 por high content screening, BE.EP.DR
• Assunto(s): Diferenciação celular Pluripotência Células-tronco pluripotentes MicroRNAs
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: diferenciação celular | High-Content Screening | MicroRNAs | NTera-2 | pluripotência | Células-Tronco Pluripotentes

Resumo

A pluripotência é a capacidade que algumas células possuem de dar origem às células dos três folhetos embrionários (ectoderma, mesoderma e endoderma), bem como às células germinativas. As células-tronco embrionárias (CTE) são as células pluripotentes mais conhecidas, as quais apresentam uma elevada capacidade de diferenciação celular e auto-renovação. Estas propriedades tornam as CTE potenciais ferramentas para a medicina regenerativa, porém seu uso na prática não é viável, pois, além das questões éticas, é necessário que estas células sejam imunologicamente compatíveis com o receptor. Com o objetivo de contornar este problema, foram criadas as células-tronco de pluripotência induzidas (iPSc). Estas células, por sua vez, são obtidas a partir da reprogramação nuclear por meio inserção de alguns fatores relacionados à pluripotência, inicialmente sendo estes fatores aqueles conhecidos como os quatro fatores de Yamanaka (Oct4, Sox2, c-Myc e Klf4). Recentemente foram descobertos alguns RNAs reguladores, os microRNAs (miRNAs), que possuem um papel muito importante na manutenção da pluripotência, bem como no processo de diferenciação celular. Estes miRNAs são pequenas moléculas de RNA que atuam como reguladores pós-transcricionais da expressão gênica, se ligando ao mRNA alvo e inibindo assim a tradução. Além da manutenção da pluripotência e do processo de diferenciação celular, estes miRNAs parecem também regular diferentes outros processos celulares, tais como a proliferação e a morte celular, dentre outros. É sabido que o emprego de moléculas sintéticas de miRNAs é capaz de gerar iPSc ou melhorar a eficiência de geração dessas assim como de induzir a diferenciação celular em células-tronco. As células de carcinoma embrionário (CCE) possuem características semelhantes às CTE, como pluripotência, capacidade de diferenciação in vitro e potencial para a geração de teratomas in vivo. Análises comparativas entre os perfis de expressão de mRNA e miRNA de CTE e CCE demonstraram uma grande similaridade entre ambas, por isso, culturas de CCE são amplamente empregadas para estudos relacionados à biologia de células-tronco pluripotentes. O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito de diferentes miRNAs em uma linhagem de CCE humana, a NTera-2, por meio do uso de moléculas sintéticas precursoras de miRNAs (pre-miRs) ou inibidores de miRNAs (anti-miRs), estudando o efeito destas moléculas sobre a proliferação celular, apoptose e diferenciação celular, utilizando-se de diferentes metodologias, tais como qPCR, microarrays de DNA e High Content Analysis/Microscopy (HCS).

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

PANEPUCCI, RODRIGO ALEXANDRE; DE SOUZA LIMA, ILDERCILIO MOTA. Arrayed functional genetic screenings in pluripotency reprogramming and differentiation. STEM CELL RESEARCH & THERAPY, v. 10, JAN 11 2019. (15/15864-6, 13/08135-2, 15/08070-3, 13/27061-0)

DE SOUZA LIMA, ILDERCILIO MOTA; DOS SANTOS SCHIAVINATO, JOSIANE LILIAN; PAULINO LEITE, SARAH BLIMA; SASTRE, DANUTA; DE OLIVEIRA BEZERRA, HUDSON LENORMANDO; SANGIORGI, BRUNO; CORVELONI, AMANDA CRISTINA; THOME, CAROLINA HASSIBE; FACA, VITOR MARCEL; COVAS, DIMAS TADEU; et al. High-content screen in human pluripotent cells identifies miRNA-regulated pathways controlling pluripotency and differentiation. STEM CELL RESEARCH & THERAPY, v. 10, JUL 8 2019. (15/08070-3, 15/15864-6, 13/27061-0, 13/08135-2)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

LIMA, Ildercílio Mota de Souza. Identificação de vias moduladas por microRNAs na diferenciação celular e manutenção da pluripotência em células humanas. 2017. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (PCARP/BC) Ribeirão Preto.