Estudo do mecanismo de ação do inibidor de protease EcTI e peptídeos sintéticos estruturalmente relacionados ao inibidor em linhagens de células leucêmicas humanas.

• Processo: 13/13239-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2014
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2017
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Maria Luiza Vilela Oliva
• Beneficiário: Luciana de Andrade Luz Costa
• Instituição Sede: Instituto Nacional de Farmacologia (INFAR). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 09/53766-5 - Proteínas de origem vegetal com seletividade para inibição de enzimas de mamíferos e seu papel como agente anti-inflamatório, antitrombótico, antidiabético e antitumoral, AP.TEM
• Assunto(s): Transdução de sinais Peptídeos Neoplasias Inibidores de proteases
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer | inibidores de proteases | peptídeos | sinalização celular | Caracterização e aplicações biotecnológicas de proteínas

Resumo

Vários estudos descrevem a ação de inibidores de protease sob a coagulação sanguínea, processos digestivos e inflamatórios, remodelação do tecido, além de serem capazes de regular a proliferação, apoptose e o ciclo celular. EcTI é um inibidor de massa molecular 20 kDa isolado das sementes de Enterolobium contortisiliquum que inibe a atividade de tripsina, quimotripsina, calicreína plasmática humana (HuPK), plasmina, elastase de neutrófilo humano e está envolvido na ativação da MMP-2 e MMP-9. Já foi demonstrado o efeito inibitório de EcTI sob a viabilidade de células de câncer colorretal, câncer de mama, bem como nas linhagens de leucemias humanas (K562 e THP-1), propostas neste trabalho. Ainda, EcTI inibe a invasão de células de câncer gástrico por alterações na via de sinalização celular dependente de integrinas. Assim, a capacidade de controlar as inúmeras funções sinalizadoras das proteases tem tornado este inibidor um instrumento interessante para estudos em modelos de câncer. Diversos estudos tem reportado a participação do metabolismo energético mitocondrial e a formação das espécies reativas de oxigênio (EROs) nos processos de diferenciação, manutenção, sinalização e sobrevivência de células leucêmicas. Dessa forma, a proposta deste trabalho é investigar os mecanismos envolvidos na inibição da viabilidade das linhagens K562 e THP-1 por EcTI, bem como analisar o estado de estresse oxidativo nestas células após o tratamento com o inibidor. Ainda, é nosso objetivo avaliar o efeito de peptídeos sintéticos derivados do sítio reativo de EcTI procurando estabelecer a menor estrutura responsável pela função inibidora.