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Utilização de PCR em tempo real quantitativo para diagnóstico diferencial entre Salmonella enterica subesp. enterica sorovares enteritidis, Typhimurium e Gallinarum (biovares Gallinarum e Pullorum) em aves domésticas (Gallus Gallus)

Processo: 14/05496-7
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de julho de 2014
Vigência (Término): 31 de dezembro de 2017
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Patologia Animal
Convênio/Acordo: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Pesquisador responsável:Angelo Berchieri Junior
Beneficiário:Marcela da Silva Rubio
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
Assunto(s):Salmonella enterica   Técnicas de diagnóstico animal   Galinhas

Resumo

O objetivo dessa pesquisa é aplicação da técnica da PCR em tempo real para diagnóstico indireto e quantificação da carga bacteriana em órgãos e fezes de aves comerciais experimentalmente infectadas por Salmonella enterica subesp. enterica sorovares enteritidis (SE), Typhimurium (STM) e Gallinarum (biovares Gallinarum e Pullorum), em diferentes momentos pós-infecção. Serão conduzidos 2 experimentos (in vitro e in vivo). As análises in vitro serão realizadas para diagnóstico diferencial e detecção específica de cada estirpe bacteriana (SE, STM, SG e SP), utilizando 3 diferentes misturas para cada bactéria. O primeiro tratamento consistirá de uma mistura das 4 estirpes bacterianas como amostra teste. No segundo, utilizar-se-á uma mistura de 3 estirpes bacterianas, excluindo a bactéria de interesse, como amostra controle negativo e no terceiro, como reação controle positivo, será utilizado somente a estirpe bacteriana de interesse. Para o experimento in vivo, serão utilizadas 36 aves para postura de linhagem comercial branca, divididas em 6 grupos (n=6). No grupo A, as aves não serão infectadas e serão mantidas como controle negativo. As aves dos grupos B, C, D e E, serão infectadas com SE, STM, SG e SP, respectivamente. No grupo F, as aves serão infectadas com um inóculo contendo as quatro estirpes bacterianas. Os inóculos serão administrados por via oral, no primeiro dia de vida das aves. Às 24h e às 72h após o desafio, 3 aves de cada grupo serão eutanasiadas para a colheita de amostras de baço e fezes, para extração de DNA bacteriano e quantificação bacteriana através da técnica da PCR em tempo real. Os resultados obtidos serão comparados pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
RUBIO, M. S.; PENHA, F. R. A. C.; ALMEIDA, A. M.; BARBOSA, F. O.; BERCHIERI JR, A. Duplex Real-Time PCR Using Sybr Green I for Quantification and Differential Diagnosis between Salmonella Enteritidis and Salmonella Typhimurium. Brazilian Journal of Poultry Science, v. 21, n. 1 JAN-MAR 2019. Citações Web of Science: 0.
RUBIO, MARCELA DA SILVA; CASARIN PENHA FILHO, RAFAEL ANTONIO; DE ALMEIDA, ADRIANA MARIA; BERCHIERI JUNIOR, ANGELO. Development of a multiplex qPCR in real time for quantification and differential diagnosis of Salmonella Gallinarum and Salmonella Pullorum. AVIAN PATHOLOGY, v. 46, n. 6, p. 644-651, 2017. Citações Web of Science: 2.
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
RUBIO, Marcela da Silva. Utilização de PCR em tempo real quantitativo para diagnóstico diferencial entre Salmonella enterica subesp. enterica sorovares Enteritidis, Typhimurium e Gallinarum (biovares Gallinarum e Pullorum) em aves domésticas (Gallus gallus). 2017. Tese de Doutorado - Universidade Estadual Paulista "Júlio de Mesquita Filho" Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias..

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