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Níveis de IL-8 em tecido pulmonar de coelhos recém-nascidos com síndrome de aspiração de mecônio após tratamento com surfactante bovino

Processo: 14/00950-1
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Vigência (Início): 01 de julho de 2014
Vigência (Término): 30 de abril de 2015
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
Pesquisador responsável:João Cesar Lyra
Beneficiário:Derek Silva Moreira
Instituição-sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Assunto(s):Neonatologia   Surfactantes   Recém-nascido   Inflamação   Interleucinas

Resumo

Introdução: Síndrome de Aspiração Meconial (SAM) acomete recém-nascidos que, submetidos à hipóxia fetal, tenham eliminado mecônio e pode levar ao desenvolvimento de Insuficiência Respiratória Grave. Apesar dos avanços em sua terapêutica, mantém-se associada a altas taxas de mortalidade. A impregnação dos pulmões por mecônio inativa o surfactante pulmonar, causando atelectasia. A SAM também ativa processos inflamatórios associados lesão tecidual importante, por meio do estímulo à liberação de mediadores inflamatórios, como a Interleucina-8 (IL-8), que está diretamente relacionada à piora da função pulmonar. Um dos tratamentos para a SAM é a reposição de surfactante, com surfactante de origem animal. Apesar de ensaios clínicos apresentarem resultados controversos, estudos experimentais têm demonstrado aspectos positivos dessa terapia, dentre eles, o controle da reação inflamatória, por meio da redução dos níveis de Citocinas e Quimiocinas, dentre elas, a IL-8. A hipótese do presente estudo é de que o surfactante reduza os níveis de IL-8 nos pulmões de coelhos recém-nascidos, de termo, acometidos pela doença, diminuindo, consequentemente, a lesão tecidual.Objetivos: determinar os níveis de IL-8 em macerado de tecido pulmonar de coelhos recém-nascidos com SAM, submetidos à ventilação mecânica, com e sem tratamento com surfactante bovino, comparando com grupo controle sem doença e sem terapia de reposição de surfactante. Material e Métodos: coelhos recém-nascidos, de termo, serão sedados e submetidos à traqueostomia e, em seguida, divididos, aleatoriamente, em três grupos de estudo: "Controle" - animais sem a doença (SAM) e sem tratamento de reposição de surfactante; "MEC" - animais com administração de mecônio (6ml/kg - 65mg/ml), e sem tratamento; "SURVA" - animais que receberão o mecônio, nas mesmas condições do grupo "MEC", e a terapia de reposição de surfactante (100 mg/kg - S100). Após a randomização, todos os animais serão submetidos à ventilação mecânica padronizada (pressão ventilatória necessária para a manutenção de volume-corrente de 8ml/kg - descrever todos os parâmetros da ventilação: PIP, PEEP, FR e Fi O2), durante 20 minutos, com aquisição de dados de mecânica pulmonar aos 5, 10, 15 e 20 minutos do processo, por meio de um pneumotacógrafo acoplado a um sistema de aquisição de dados em tempo real (Software). Após a ventilação, será realizada eutanásia dos animais, com posterior retirada e dissecção dos pulmões e dosagem da IL-8 no homogenato do macerado pulmonar. As mensurações serão feitas pelo método de ELISA (ensaio imunoenzimático), com kit de IL-8 para coelhos, produzido pela UCNLIFE.O estudo será realizado com a estrutura física e de recursos humanos disponíveis no Laboratório Experimental do Departamento de Pediatria da Faculdade de Medicina de Botucatu - UNESP. Em 2011 foi montado o Laboratório de Investigação de Doenças Respiratórias Neonatais, com verba da FAPESP, processo número 2010/1151-1. Para a realização desse experimento o laboratório utilizará recursos remanescentes de projetos anteriores.A análise estatística será baseada na comparação das médias entre os grupos, feita utilizando-se "ANOVA ONE WAY". Será utilizado "Student-Newman-Keuls" como pós-teste discriminatório, adotando-se um nível de significância de 5%. Quando os dados não apresentarem os pré-requisitos de distribuição normal e mesma variância, será utilizado "Kruskal-Wallis Análise de Variância One Way em Ranks" como opção de teste para dados não paramétricos. A comparação entre proporções será feita utilizando-se o teste do Qui-quadrado.Resultados Esperados: Espera-se que os pulmões dos animais com SAM que receberem a terapia de reposição de surfactante apresentem menor concentração de IL-8 e, consequentemente, menor lesão inflamatória pulmonar, quando comparados aos pulmões do grupo dos animais acometidos pela doença e sem tratamento.

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