Efeito da administração de células-tronco mesenquimais sobre a expressão de transportadores de água e eletrólitos no rim de ratos normotensos e com estenose da artéria renal

• Processo: 14/01814-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Vigência (Início): 01 de agosto de 2014
• Vigência (Término): 30 de junho de 2015
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Clínica Médica
• Pesquisador responsável: Mirian Aparecida Boim
• Beneficiário: Vanessa Araujo Varela
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Nefrologia Hipertensão Artéria renal Células-tronco mesenquimais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: célula-tronco mesenquimal | estenose da artéria renal | hipertensão | transportadores renais | Nefrologia

Resumo

Vários estudos apontam para os benefícios das células-tronco mesenquimais (CTM) no tratamento de diversas patologias devido aos seus efeitos regeneradores, anti-inflamatórios e anti-apoptóticos. Estudos prévios do nosso laboratório demonstraram que o tratamento com CTM em ratos com hipertensão renovascular 2 Rins - 1 Clipe (2R-1C) preveniu o aumento da pressão arterial, melhorou a arquitetura renal, reduziu a inflamação, a rarefação microvascular e a fibrose do rim clipado. Animais 2R-1C apresentaram redução na excreção urinária de sódio (UNaV) e aumento na diurese (V), e as CTM normalizaram a UNaV, mas não reverteu a poliúria, sugerindo que as CTM possam ter um efeito tubular independente dos efeitos regenerativos do parênquima renal. Portanto, o objetivo deste estudo é avaliar o efeito das CTM sobre a função tubular através da avaliação da expressão dos transportadores de água e eletrólitos no córtex e medula do rim de ratos normais e com estenose da artéria renal. Metodologia: As CTM serão obtidas através de punção da medula óssea e após o isolamento e a purificação serão expandidas e repassadas a um meio de cultura para proporcionar uma proliferação adequada. Ratos Wistar machos e adultos serão divididos em: Grupo Controle (sem tratamento); Grupo Controle + CTM (tratamento com CTM) Grupo 2R-1C (animais submetidos à cirurgia para implantação do clipe na artéria renal); Grupo 2R-1C + CTM (animais submetidos à cirurgia para implantação do clipe na artéria renal que receberão tratamento com CTM). As CTM serão administradas em duas doses (2x105 células) com intervalo de 2 semanas. A cirurgia para implantação do clipe na artéria renal esquerda será realizada na primeira semana dos grupos 2R-1C e 2R-1C + CTM. A pressão arterial de cauda será acompanhada semanalmente. Duas semanas após a administração da 2ª dose, os animais serão submetidos à Gaiola Metabólica e coleta de urina de 24 hs, os animais serão eutanasiados e o sangue será coletado para dosagem de creatinina, sódio, potássio e após a eutanásia, os rins serão removidos para análise histológica e de imunohistoquímica. A expressão gênica será feita por PCR em tempo real e a expressão protéica por Western Blot dos seguintes transportadores: trocador sódio/hidrogênio (NHE3), canal de sódio (ENaC), bomba de Na/K ATPase, cotransportador Na/K/2Cl e os canais de água aquaporinas 1 e 2 (AQP1 e AQP2).