Ação da terapia fotodinâmica antimicrobiana na expressão de genes de Candida albicans em biofilmes

• Processo: 13/22897-2
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Vigência (Início): 01 de julho de 2014
• Vigência (Término): 30 de novembro de 2017
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Convênio/Acordo: Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
• Pesquisador responsável: Antonio Olavo Cardoso Jorge
• Beneficiário: Fernanda Freire
• Instituição-sede: Instituto de Ciência e Tecnologia (ICT). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José dos Campos. São José dos Campos , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 14/25772-9 - Monitoramento do efeito da terapia fotodinâmica em infeccção oral por Candida Albicans em camundongos imunossuprimidos por imagem de bioluminescência, BE.EP.DR
• Assunto(s): Biofilmes Candida albicans Fatores de virulência Terapia fotodinâmica Reação em cadeia da polimerase em tempo real

Resumo

Os micro-organismos estão se tornando cada vez mais resistentes aos antimicrobianos e cepas de Candida albicans estão resistentes a antifúngicos, assim, torna-se importante e necessário a realização de pesquisas que avaliem os efeitos de novos métodos terapêuticos, como a terapia fotodinâmica (TFD), sobre fatores de virulência de C. albicans relacionados à aderência, formação de hifas e de biofilme. Assim, o objetivo deste estudo será verificar os efeitos da terapia fotodinâmica sobre biofilmes de Candida albicans, avaliando seus efeitos sobre a expressão dos genes TEC1 (fator de transcrição), HWP1 (proteína de parede celular das hifas), EFG1 (regulador transcricional relacionado com a morfogênese), BCR1 (regulador da formação de biofilme e da parede celular), ACE2 (regulador transcricional envolvido na morfogênese) e ALS1 (adesina) pela levedura. Serão avaliadas 30 amostras isoladas de pacientes portadores de HIV e 30 amostras de pacientes com estomatite protética, quanto a produção de biofilme, peso seco e XTT, para quantificação dos biofilmes. Destas, serão selecionadas 5 amostras de cada grupo que apresentarem melhor capacidade de formação de biofilme. Assim, serão utilizadas amostras clínicas de C. albicans que foram isoladas de pacientes portadores de HIV (n=5), de pacientes com estomatite protética (n=5) e uma cepa padrão ATCC 18804. A quantificação da expressão dos genes será relacionada à produção desses genes nas amostras clínicas e na cepa de referência utilizando-se ensaio de PCR em tempo real. A presença e a expressão dos genes serão analisadas antes e após a terapia fotodinâmica. Para terapia fotodinâmica serão utilizados os fotossensibilizadores azul de metileno a 300 µM e eritrosina a 5 µM sensibilizados com laser de gálio-alumínio-arseneto de baixa potência (vermelho visível, 660 nm) e LED verde (532 ± 10 nm), respectivamente. Serão avaliados quatro grupos experimentais, para cada amostra: a) F+L+: sensibilização com o corante e irradiação com luz; b) F+L-: somente tratamento com o fotossensibilizador; c) F-L+: somente irradiação com luz e d) F-L-: grupo controle, sem sensibilização com o corante e ausência de luz. Além da avaliação da expressão dos genes TEC1, HWP1, EFG1, BCR1, ACE2 e ALS1, será verificada a atividade metabólica das células de cada amostra para os quatro grupos testados através do ensaio colorimétrico com XTT. Os resultados obtidos serão analisados pelo software Minitab com nível de significância de 5% e pelo Software do equipamento de real-time. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

FREIRE, FERNANDA; DE BARROS, PATRICIA PIMENTEL; PEREIRA, CRISTIANE APARECIDA; JUNQUEIRA, JULIANA CAMPOS; CARDOSO JORGE, ANTONIO OLAVO. Photodynamic inactivation in the expression of the Candida albicans genes ALS3, HWP1, BCR1, TEC1, CPH1, and EFG1 in biofilms. Lasers in Medical Science, v. 33, n. 7, p. 1447-1454, SEP 2018. Citações Web of Science: 3.

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

FREIRE, Fernanda. Expressão dos genes ALS3, HWP1, BCR1, TEC1, CPH1 e EFG1 de Candida albicans em biofilmes após inativação fotodinâmica. 2017. 64 f. Tese de Doutorado - Universidade Estadual Paulista "Julio de Mesquita Filho" Instituto de Ciência e Tecnologia (Campus de São José dos Campos)..