Caracterização biofísica e estrutural da interação entre KGA (kidney type glutaminase) e PPARG (Peroxisome Proliferator-Activated Receptor gamma)

• Processo: 14/19518-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Vigência (Início): 01 de dezembro de 2014
• Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2017
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Andre Luis Berteli Ambrosio
• Beneficiário: Camila Cristina Pascoal
• Instituição Sede: Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia e Inovação (Brasil). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Biologia estrutural Glutaminase Receptores ativados por proliferador de peroxissomo Cristalografia de raios X Transferência ressonante de energia de fluorescência
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalografia de raios-X | Interação proteína-proteína | Kga | PPAR gamma | Biologia Estrutural

Resumo

KGA (kidney-type glutaminase) é uma das isoformas da glutaminase, enzima responsável por catalisar a conversão de glutamina em glutamato. Esta reação é o primeiro passo para a glutaminólise, um dos mecanismos responsáveis por abastecer o ciclo do ácido tricarboxílico (TCA) e fornecer precursores biossintéticos para a manutenção do fenótipo proliferativo de células tumorais. PPARs (peroxisome proliferator-activated receptors) englobam uma superfamília de receptores nucleares que controlam a expressão de vários genes do metabolismo de lipídeos e glicose. A isoforma PPAR³ é responsável por regular a proliferação, diferenciação e apoptose de várias células cancerosas humanas. Além de suas importantes contribuições para o processo tumoral amplamente descritas na literatura, KGA e PPAR³ parecem atuar como parceiros de interação, segundo estudos realizados em nosso grupo. Inicialmente, ensaios de duplo-híbrido indicaram a porção N-terminal de KGA e o LBD (Ligand Binding Domain) de PPAR³ como prováveis regiões interagentes. Diversos ensaios in vivo estão sendo feitos para caracterizar a natureza desta interação no contexto celular tumoral. Paralelamente, o projeto de pesquisa aqui proposto tem por objetivo a caracterização desta interação através de abordagens biofísicas e estruturais. A princípio, propomos a identificação das regiões interagentes mínimas de KGA e PPAR³, assim como a determinação dos parâmetros termodinâmicos e energéticos da interação. A seguir, propomos a resolução estrutural de KGA isolada e em complexo com PPAR³ por cristalografia de raios-X. Por fim, serão feitas análises in vivo utilizando a técnica de microscopia de FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer). (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DE GUZZI CASSAGO, CAROLINA APARECIDA; DIAS, MARILIA MEIRA; PINHEIRO, MATHEUS PINTO; PASQUALI, CAMILA CRISTINA; SILVA BASTOS, ALLINY CRISTINY; ISLAM, ZEYAUL; CONSONNI, SILVIO ROBERTO; DE OLIVEIRA, JULIANA FERREIRA; GOMES, EMERSON MACHI; RODRIGUES ASCENCAO, CAROLLINE FERNANDA; et al. Glutaminase Affects the Transcriptional Activity of Peroxisome Proliferator-Activated Receptor gamma (PPAR gamma) via Direct Interaction. BIOCHEMISTRY, v. 57, n. 44, p. 6293-6307, NOV 6 2018. (14/20673-2, 11/10127-2, 17/11766-5, 16/22246-0, 15/25832-4, 10/13992-3, 14/19518-2, 11/13981-4)

Publicações acadêmicas

(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)

PASCOAL, Camila Cristina. Análises evolutiva, estrutural e mecanística da arquitetura multidomínio das glutaminases humanas e estudo da interação entre glutaminases e o receptor ativado por proliferadores de peroxissomo gama. 2017. Tese de Doutorado - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia Campinas, SP.